【摘 要】
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禽腺病毒QU弱毒株属于鸭腺病毒1型病毒,可作为潜在的重组疫苗载体.为确定QU株的复制非必需区,参照鸭腺病毒1型病毒基因组右侧E4区附近序列设计引物,扩增QU株基因组的一段3.4
【机 构】
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山东师范大学生命科学学院动物抗性省级重点实验室,济南,250014山东省农业科学院家禽研究所,济南,250023;
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禽腺病毒QU弱毒株属于鸭腺病毒1型病毒,可作为潜在的重组疫苗载体.为确定QU株的复制非必需区,参照鸭腺病毒1型病毒基因组右侧E4区附近序列设计引物,扩增QU株基因组的一段3.4 kb片段.插入来自pEGFP-C1质粒的增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因表达盒片段,构建了含EGFP基因的重组质粒pADGFP.采用脂质体介导法.将重组质粒pADGFP与QU株共转粢CEF细胞.用96孔板稀释法筛选纯化表达绿色荧光蛋白的重组QU病毒株rQUGFP.该重组毒的生长曲线与亲本毒一致,连续传代后病毒滴度稳定.结果表明,QU株基因组右侧E4区附近一段包括ORF1、ORF8和ORF9三个开放阅读框的区域为病毒的复制非必需区,且插入的EGFP基因可以稳定表达,为进一步以禽腺病毒QU株为栽体构建重组疫苗的研究打下基础.
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