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摘 要：以不同浓度的烧烤食品处理培养基饲养果蝇，观察统计与寿命相关的3个指标及子代成蛹数、成虫数、致畸率的作用。结果显示：低浓度的烧烤食品对果蝇寿命相关的3个指标作用不明显，高浓度的烧烤食品使果蝇寿命相关的3个指标显著下降，该作用还存在性别差异，表现出对雌性的影响大于雄性；烧烤食品能明显提高果蝇的繁殖力，但却增加了翅膀上的变异，出现了双焦状翅和单焦状翅。
关键词：烧烤食品；果蝇；寿命；生殖力；致畸率
中图分类号 R155.5 文献标识码 A 文章编号 1007-7731（2015）22-35-03
Abstract：Barbecue food processing with different concentration of feeding medium fruit flies，observation statistics and the three indicators related with life and number of offspring into pupa，and adult worms， teratogenic rate.The results showed low concentration of barbecue food related to fruit flies life effect is not obvious，three indexes of high concentrations of barbecue food make drosophila longevity relate three index dropped significantly，gender differences，the effect also show the influence on female than male.Barbecue food can obviously increase the flies fertility，but increase the variation on the wings， a bifocal wings and single focal wings.
Key words：Barbecue food；Fruit flies；Longevity；Fertility ；Rate of birth defects
烧烤肉食品色香味美，赢得广大消费者的青睐。然而，经常吃烧烤却会影响身体健康，研究发现，经常吃烧烤肉会增加患癌的危险性[1]。另外， 高温会将一部分肉烧焦[2]，形成能引起人“致突变”的化学物质，不仅对自己身体健康有极大危害，还可能会给后代带来遗传上的危害。果蝇生命周期短，其代谢、生理状况和生长发育等同哺乳动物基本相似，因此是最常用的实验模型[3]。本研究以果蝇为实验动物，探讨烧烤食品对果蝇寿命、繁殖力和致畸的作用，为烧烤食品所产生的生物学效应提供参考依据。
1 材料与方法
1.1 材料 野生型果蝇由信阳农林学院生物技术系生命科学实验室提供。样品的制备：从市场上购买新鲜的烤肉串，取下肉块，用刀切成小块，置于烘箱内烘干至恒重，再用研钵研磨成粉末备用。
1.2 方法
1.2.1 培养基的制备 称取琼脂10g，加入1 000mL蒸馏水加热溶解，再加入玉米粉112g和蔗糖89g，搅拌均匀后煮沸。待温度降到 50℃左右时，加入8mL丙酸和10g酵母搅拌均匀，制成对照培养基（ck）。在对照培养基中加入烧烤食品搅拌均匀后制成处理培养基，使其终浓度分别为0.5g/L（Ⅰ）、1g/L（Ⅱ）、1.5g/L（Ⅲ）、2g/L（Ⅳ），分别分装到洁净的培养试管中，每管培养基厚度约为1.5cm，冷却备用。
1.2.2 寿命测定 收集8h内羽化的未交配的果蝇[4-5]，按性别放到不同浓度烧烤食品培养基中，每组10瓶，每瓶5只，每天观察统计果蝇的数目，每隔5d更换一次新鲜培养基，直到果蝇全部死亡。由培养基粘死，或因其他意外因素死亡的果蝇不计。1/2死亡时间=每组果蝇死亡1/2时的时间；平均寿命=每组果蝇生存时间的总和/该组果蝇数×100%；最高寿命=每组最后10只死亡果蝇的寿命的算术平均数。
1.2.3 生殖力和致畸率测定 继续培养原培养瓶，使虫卵发育为成虫。记录每瓶子一代（F1）的成蛹数和自第1只成虫孵出后7d内F1成虫数；随机取3对F1代处女蝇和雄果蝇继续在相同的处理培养基中饲养，7d后移去F1代，记录每管子二代（F2）的成蛹数和自第1只成虫孵出后7d内成虫数。将F1、F2代果蝇麻醉后在显微镜下观察翅膀变异的情况，统计果蝇的致畸数。致畸率指羽化出的果蝇中发生畸变的果蝇数与成虫数的比值。
1.2.4 数据统计 本试验所有数据均用originpro7.5数据处理软件进行T-test，分析差异显著性（0.01≤p<0.05表明差异显著；0.001≤p<0.01表明差异极显著；p>0.05表明无显著差异）。
2 结果与分析
2.1 烧烤食品对果蝇寿命的影响 通过对果蝇1/2死亡时间、平均寿命、最高寿命3个寿命指标进行统计分析（表1），结果表明，与对照组相比，Ⅰ处理组仅雌果蝇的最高寿命差异显著，增加了9.09%；Ⅱ处理组仅雄果蝇的平均寿命差异显著，降低了9.47%；Ⅲ处理组雌果蝇的平均寿命和雄果蝇的半数死亡时间差异显著，分别降低了11.59%、10.24%；Ⅳ处理组雌雄果蝇的3个寿命指标均降低，雌果蝇1/2死亡时间和平均寿命差异极显著，分别降低了19.08%、16.16%，最高寿命差异显著，降低了9.21%，雄果蝇的1/2死亡时间和最高寿命差异显著，分别降低了15.82%、9.84%，平均寿命差异极显著，降低了16.57%。由此可见，低浓度的烧烤食品对果蝇毒害作用不明显，高浓度的烧烤食品对果蝇有显著的毒害作用，该作用还存在性别差异，表现出对雌性的影响大于雄性。 2.2 烧烤食品对果蝇对果蝇生殖力及致畸性的影响 通过对果蝇子代成蛹数、成虫数及致畸数进行统计分析，子代成蛹数和成虫数是反映生殖力的2个重要指标[6-7]，结果如表2所示。由表2可看出，与对照组相比，Ⅰ处理组F1代的成蛹数和成虫数均差异显著，分别增加了17.09%、16.65%，F2代的成蛹数和成虫数均差异不显著，分别增加了4.82%、4.82%、；Ⅱ处理组F1代的成虫数和F2代的成蛹数差异极显著，分别增加了18.73%、12.08%；Ⅲ处理组F1代的成蛹数和成虫数以及F2代的成蛹数差异极显著，分别增加了18.66%、17.32%、14.59%，F2代的成虫数差异显著，增加了10.22%；Ⅳ处理组F1代成虫数差异显著，增加了7.56%，F2代的成蛹数差异显著，增加了3.58%。由此可见，Ⅲ处理组对果蝇的生殖力影响最大，推测可能是因为添加一定浓度烧烤食品，给培养基补充了充足的氮源，酵母菌繁殖旺盛，果蝇营养供给丰富，故而生殖力提高。随着烧烤食品浓度的增加，Ⅳ处理组果蝇生殖力与对照相比有所增加，但较前三处理组明显下降。由此可见，处理组浓度越高，有害物质相应也有所增加，果蝇生殖力反而呈下降趋势。
观察羽化后的成蝇外观，发现以翅膀的畸形变异居多，有小翅、卷翅、单翅、缺刻翅、焦翅等，其中单焦状翅（图1.1）和双焦状翅（图1.2）出现较多。由表2可见，与对照组相比，4个处理组的F1代和F2代的致畸率均明显增高，达到差异极显著水平，并且F2代的致畸率高于F1代，值得注意的是，当烧烤食品浓度最高时，即Ⅳ处理组，F1代致畸率为6.43%，F2代致畸率为8.76%。
3 讨论
基于烧烤食品对人体的危害，以不同浓度的烧烤食品处理培养基饲养果蝇，观察统计与寿命相关的3个指标及子代成蛹数、成虫数、致畸率。结果如下：
（1）低浓度的烧烤食品对果蝇寿命的作用不明显，高浓度的烧烤食品使果蝇寿命显著下降，而且还存在性别差异，表现出对雌性的影响大于雄性。
（2）添加低浓度烧烤食品，果蝇的成蛹数、成虫数显著增加，达差异极显著水平。高浓度处理组也能增加果蝇的成蛹数、成虫数，但与低浓度处理组相比果蝇生殖力明显下降，说明烧烤食品浓度越高有害物质也相应增加，果蝇受有害物质的影响，繁育能力呈下降趋势。
（3）观察羽化后的成蝇外观，以翅膀的畸形变异居多，主要有单焦状翅和双焦状翅，低浓度的烧烤食品即能对果蝇产生致畸作用，并且浓度越高产生的致畸作用越强，而且一代比一代更明显。
通过此实验可以看出，烧烤食品对果蝇具有潜在的危害作用，利用果蝇来研究烧烤食品对人体的危害还有待于继续研究。但是爱吃烧烤食品的人们不得不引起重视，特别是儿童，正处于生长发育时期，体内各个器官功能尚不完善，更容易致病，因此应适当减少食用烧烤食品。
参考文献
[1]杜淑琴.浅谈煎炸烧烤食物与人体的健康[J].科技资讯，2014（32）：200-201.
[2]金玉玲，曹俊峰，任辉等.南阳市市售油炸、烧烤食品苯并（a）芘检测分析[J].河南预防医学杂志，2014，6：448-450.
[3]乔亚迢，吕舜杰，荆林海.“观察果蝇的生殖与发育”的实验教学[J].生物学通报，2014，49（9）：26-28.
[4]韦日明，黄俊杰，罗峙均.烧烤牛肉食品对果蝇致突变性的影响[J].环境与职业医学学院，2009.12，26（6）：575-576.
[5]阿布都热合曼·吐尔逊，郑雅，王玉凤.甲醛对果蝇发育和繁殖的影响[J].环境昆虫学报，2011，33（1）：13-16.
[6]杨冬梅，陶双伦，何 岚，等.爬沙虫提取液对果蝇繁殖力及寿命的影响[J].天然产物研究与开发，2012，（24）：366-369.
[7]孙冰，林欣大，张春红.沙丁胺醇对果蝇的化蛹、羽化、寿命及抗氧化能力和DNA损伤的影响[J].中国农业科学2014，47（19）：3890-3897.
（责编：徐焕斗）
关键词：烧烤食品；果蝇；寿命；生殖力；致畸率
中图分类号 R155.5 文献标识码 A 文章编号 1007-7731（2015）22-35-03
Abstract：Barbecue food processing with different concentration of feeding medium fruit flies，observation statistics and the three indicators related with life and number of offspring into pupa，and adult worms， teratogenic rate.The results showed low concentration of barbecue food related to fruit flies life effect is not obvious，three indexes of high concentrations of barbecue food make drosophila longevity relate three index dropped significantly，gender differences，the effect also show the influence on female than male.Barbecue food can obviously increase the flies fertility，but increase the variation on the wings， a bifocal wings and single focal wings.
Key words：Barbecue food；Fruit flies；Longevity；Fertility ；Rate of birth defects
烧烤肉食品色香味美，赢得广大消费者的青睐。然而，经常吃烧烤却会影响身体健康，研究发现，经常吃烧烤肉会增加患癌的危险性[1]。另外， 高温会将一部分肉烧焦[2]，形成能引起人“致突变”的化学物质，不仅对自己身体健康有极大危害，还可能会给后代带来遗传上的危害。果蝇生命周期短，其代谢、生理状况和生长发育等同哺乳动物基本相似，因此是最常用的实验模型[3]。本研究以果蝇为实验动物，探讨烧烤食品对果蝇寿命、繁殖力和致畸的作用，为烧烤食品所产生的生物学效应提供参考依据。
1 材料与方法
1.1 材料 野生型果蝇由信阳农林学院生物技术系生命科学实验室提供。样品的制备：从市场上购买新鲜的烤肉串，取下肉块，用刀切成小块，置于烘箱内烘干至恒重，再用研钵研磨成粉末备用。
1.2 方法
1.2.1 培养基的制备 称取琼脂10g，加入1 000mL蒸馏水加热溶解，再加入玉米粉112g和蔗糖89g，搅拌均匀后煮沸。待温度降到 50℃左右时，加入8mL丙酸和10g酵母搅拌均匀，制成对照培养基（ck）。在对照培养基中加入烧烤食品搅拌均匀后制成处理培养基，使其终浓度分别为0.5g/L（Ⅰ）、1g/L（Ⅱ）、1.5g/L（Ⅲ）、2g/L（Ⅳ），分别分装到洁净的培养试管中，每管培养基厚度约为1.5cm，冷却备用。
1.2.2 寿命测定 收集8h内羽化的未交配的果蝇[4-5]，按性别放到不同浓度烧烤食品培养基中，每组10瓶，每瓶5只，每天观察统计果蝇的数目，每隔5d更换一次新鲜培养基，直到果蝇全部死亡。由培养基粘死，或因其他意外因素死亡的果蝇不计。1/2死亡时间=每组果蝇死亡1/2时的时间；平均寿命=每组果蝇生存时间的总和/该组果蝇数×100%；最高寿命=每组最后10只死亡果蝇的寿命的算术平均数。
1.2.3 生殖力和致畸率测定 继续培养原培养瓶，使虫卵发育为成虫。记录每瓶子一代（F1）的成蛹数和自第1只成虫孵出后7d内F1成虫数；随机取3对F1代处女蝇和雄果蝇继续在相同的处理培养基中饲养，7d后移去F1代，记录每管子二代（F2）的成蛹数和自第1只成虫孵出后7d内成虫数。将F1、F2代果蝇麻醉后在显微镜下观察翅膀变异的情况，统计果蝇的致畸数。致畸率指羽化出的果蝇中发生畸变的果蝇数与成虫数的比值。
1.2.4 数据统计 本试验所有数据均用originpro7.5数据处理软件进行T-test，分析差异显著性（0.01≤p<0.05表明差异显著；0.001≤p<0.01表明差异极显著；p>0.05表明无显著差异）。
2 结果与分析
2.1 烧烤食品对果蝇寿命的影响 通过对果蝇1/2死亡时间、平均寿命、最高寿命3个寿命指标进行统计分析（表1），结果表明，与对照组相比，Ⅰ处理组仅雌果蝇的最高寿命差异显著，增加了9.09%；Ⅱ处理组仅雄果蝇的平均寿命差异显著，降低了9.47%；Ⅲ处理组雌果蝇的平均寿命和雄果蝇的半数死亡时间差异显著，分别降低了11.59%、10.24%；Ⅳ处理组雌雄果蝇的3个寿命指标均降低，雌果蝇1/2死亡时间和平均寿命差异极显著，分别降低了19.08%、16.16%，最高寿命差异显著，降低了9.21%，雄果蝇的1/2死亡时间和最高寿命差异显著，分别降低了15.82%、9.84%，平均寿命差异极显著，降低了16.57%。由此可见，低浓度的烧烤食品对果蝇毒害作用不明显，高浓度的烧烤食品对果蝇有显著的毒害作用，该作用还存在性别差异，表现出对雌性的影响大于雄性。 2.2 烧烤食品对果蝇对果蝇生殖力及致畸性的影响 通过对果蝇子代成蛹数、成虫数及致畸数进行统计分析，子代成蛹数和成虫数是反映生殖力的2个重要指标[6-7]，结果如表2所示。由表2可看出，与对照组相比，Ⅰ处理组F1代的成蛹数和成虫数均差异显著，分别增加了17.09%、16.65%，F2代的成蛹数和成虫数均差异不显著，分别增加了4.82%、4.82%、；Ⅱ处理组F1代的成虫数和F2代的成蛹数差异极显著，分别增加了18.73%、12.08%；Ⅲ处理组F1代的成蛹数和成虫数以及F2代的成蛹数差异极显著，分别增加了18.66%、17.32%、14.59%，F2代的成虫数差异显著，增加了10.22%；Ⅳ处理组F1代成虫数差异显著，增加了7.56%，F2代的成蛹数差异显著，增加了3.58%。由此可见，Ⅲ处理组对果蝇的生殖力影响最大，推测可能是因为添加一定浓度烧烤食品，给培养基补充了充足的氮源，酵母菌繁殖旺盛，果蝇营养供给丰富，故而生殖力提高。随着烧烤食品浓度的增加，Ⅳ处理组果蝇生殖力与对照相比有所增加，但较前三处理组明显下降。由此可见，处理组浓度越高，有害物质相应也有所增加，果蝇生殖力反而呈下降趋势。
观察羽化后的成蝇外观，发现以翅膀的畸形变异居多，有小翅、卷翅、单翅、缺刻翅、焦翅等，其中单焦状翅（图1.1）和双焦状翅（图1.2）出现较多。由表2可见，与对照组相比，4个处理组的F1代和F2代的致畸率均明显增高，达到差异极显著水平，并且F2代的致畸率高于F1代，值得注意的是，当烧烤食品浓度最高时，即Ⅳ处理组，F1代致畸率为6.43%，F2代致畸率为8.76%。
3 讨论
基于烧烤食品对人体的危害，以不同浓度的烧烤食品处理培养基饲养果蝇，观察统计与寿命相关的3个指标及子代成蛹数、成虫数、致畸率。结果如下：
（1）低浓度的烧烤食品对果蝇寿命的作用不明显，高浓度的烧烤食品使果蝇寿命显著下降，而且还存在性别差异，表现出对雌性的影响大于雄性。
（2）添加低浓度烧烤食品，果蝇的成蛹数、成虫数显著增加，达差异极显著水平。高浓度处理组也能增加果蝇的成蛹数、成虫数，但与低浓度处理组相比果蝇生殖力明显下降，说明烧烤食品浓度越高有害物质也相应增加，果蝇受有害物质的影响，繁育能力呈下降趋势。
（3）观察羽化后的成蝇外观，以翅膀的畸形变异居多，主要有单焦状翅和双焦状翅，低浓度的烧烤食品即能对果蝇产生致畸作用，并且浓度越高产生的致畸作用越强，而且一代比一代更明显。
通过此实验可以看出，烧烤食品对果蝇具有潜在的危害作用，利用果蝇来研究烧烤食品对人体的危害还有待于继续研究。但是爱吃烧烤食品的人们不得不引起重视，特别是儿童，正处于生长发育时期，体内各个器官功能尚不完善，更容易致病，因此应适当减少食用烧烤食品。
参考文献
[1]杜淑琴.浅谈煎炸烧烤食物与人体的健康[J].科技资讯，2014（32）：200-201.
[2]金玉玲，曹俊峰，任辉等.南阳市市售油炸、烧烤食品苯并（a）芘检测分析[J].河南预防医学杂志，2014，6：448-450.
[3]乔亚迢，吕舜杰，荆林海.“观察果蝇的生殖与发育”的实验教学[J].生物学通报，2014，49（9）：26-28.
[4]韦日明，黄俊杰，罗峙均.烧烤牛肉食品对果蝇致突变性的影响[J].环境与职业医学学院，2009.12，26（6）：575-576.
[5]阿布都热合曼·吐尔逊，郑雅，王玉凤.甲醛对果蝇发育和繁殖的影响[J].环境昆虫学报，2011，33（1）：13-16.
[6]杨冬梅，陶双伦，何 岚，等.爬沙虫提取液对果蝇繁殖力及寿命的影响[J].天然产物研究与开发，2012，（24）：366-369.
[7]孙冰，林欣大，张春红.沙丁胺醇对果蝇的化蛹、羽化、寿命及抗氧化能力和DNA损伤的影响[J].中国农业科学2014，47（19）：3890-3897.
（责编：徐焕斗）