小麦组蛋白H1基因保守序列原核载体的构建及表达

来源 :吉林农业大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:danxiaoni
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采用PCR技术扩增TAT—H1bs融合基因,并通过基因操作构建了融合基因的原核重组载体pET-28a—TAT-H1hs。将阳性重组质粒转化至受体菌Rosseta(DE3)感受态细胞中,以IPTG诱导表达,表达产物经聚丙烯酰胺凝胶电泳检测和western-hlot检测。结果表明:重组菌能够表达目的蛋白,软件分析结果表明表达蛋白约占菌体蛋白的40%,上清表达量约为20%。上清蛋白经纯化后,Western—blot结果显示,His—Tag单克隆抗体可以很好地与所表达的蛋白带特异性结合。所获得的融合蛋白以高效胞质
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