【摘 要】
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目的:研究高糖对人腹膜间皮细胞(HPMC)间粘合连接复合体表达的影响,探讨腹膜透析(PD)中腹膜间皮层完整性损伤的机制.方法:采用人腹膜间皮细胞株HMrSV 5为研究对象.细胞分为3
【机 构】
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上海市第一人民医院肾内科,上海,200080
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目的:研究高糖对人腹膜间皮细胞(HPMC)间粘合连接复合体表达的影响,探讨腹膜透析(PD)中腹膜间皮层完整性损伤的机制.方法:采用人腹膜间皮细胞株HMrSV 5为研究对象.细胞分为3组:①正常对照组(含5.5 mmol/L D-葡萄糖);②高糖组(含140 mmol/L D-葡萄糖);③高渗组(含5.5 mmol/L D-葡萄糖及134.5mmoL/L甘露醇),各组分别于6、12、24、48 h进行实验.采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)、Westemblot及免疫荧光等方法检测粘合连接复合体主要成分E-Cadherin、β-Catenin基因及蛋白水平表达,采用免疫荧光技术观察高糖对细胞Actin微丝骨架的影响.结果:①高糖致细胞脱落呈时间依赖效应;②高糖引起E-Cadherin、β-CateninmRNA及蛋白表达下降,免疫荧光显示二者在HPMC细胞膜上的表达明显减低,呈不连续分布;③高糖使Actin微丝骨架解体;④高渗透压组未见上述效应.结论:高糖使HPMC E-Cadherin、β-Catenin基因及蛋白表达下降,微丝骨架解体,从而损害细胞间粘合连接复合体的形成,造成腹膜间皮完整性的损害.
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