无壳葫芦籽苯丙氨酸解氨酶的纯化及其基本性质

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无壳葫芦籽黄化苗中苯丙氨酸解氨酶(PAL)经硫酸铵分级分离、亲和层析纯化,PAGE、SDS—PAGE和Sephadex G—200凝胶过滤表明为单一蛋白带或单一蛋白峰。用SephadexG—200凝胶过滤法测得无壳葫芦籽PAL的全酶分子量为280 000,SDS—PAGE测得其亚基分子量为74 000,推测无壳葫芦籽PAL均由分子量相同的四个亚基构成。测得无壳葫芦籽PAL的最适pH为8.5,酸碱稳定区域在碱侧,最适温度为45℃,具有一定的耐热性,以L—苯丙氨酸为底物测得Km为2.6×10~(-5
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