盆腔器官脱垂发病机制的比较蛋白组学研究

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目的应用双向荧光差异凝胶电泳和质谱技术,筛选并鉴定盆腔器官脱垂(POP)患者与正常对照之间的差异表达蛋白,探讨POP发生的分子机制。方法在绝经状态、年龄、体重指数、产次等因素匹配的前提下,选取5例行子宫全切和盆底重建的POP患者与5例无POP行子宫全切患者的主骶韧带复合体标本。提取组织总蛋白,普通双向电泳分离,银染显色鉴定蛋白质抽提质量和在胶图上的分布情况。荧光染料分别标记POP组、对照组以及内标,进行双向电泳得到双向荧光差异凝胶图谱。对胶图进行匹配和差异分析,筛选出两组之间丰度差异≥1.5,P<0.05的差异表达蛋白质点。将差异蛋白质点胶内酶解后进行质谱分析和数据库搜索,鉴定差异表达的蛋白质点。结果提取的组织蛋白经定量和普通双向电泳检测,平均可获得(1 224±22)个蛋白质点。获得5张双向荧光差异凝胶电泳胶图,每张胶图上共约(1 111±54)个蛋白质点,经过比较分析筛选出33个差异表达蛋白质点,均在POP组下调,最大下调比例为8.5倍。质谱成功鉴定出半凝乳素-1、亲环素A、丝切蛋白等蛋白,均在POP组下调。结论在POP患者中半凝乳素-1和亲环素A发生降调节提示,POP的发生可能与神经损伤相关。
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