【摘 要】
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目的探讨小鼠DNAJB13与HK1是否具有相互作用。方法应用双酶切连接方法构建p GEX-4T-1/Dnajb13原核表达载体,测序验证;重组质粒转化感受态细胞DH5α,用IPTG诱导融合蛋白GST-DN
【机 构】
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中南大学生殖与干细胞工程研究所,益阳市中心医院
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目的探讨小鼠DNAJB13与HK1是否具有相互作用。方法应用双酶切连接方法构建p GEX-4T-1/Dnajb13原核表达载体,测序验证;重组质粒转化感受态细胞DH5α,用IPTG诱导融合蛋白GST-DNAJB13表达,采用SDS-PAGE考马斯亮蓝染色和Western blotting分析蛋白和鉴定;提取小鼠睾丸蛋白,采用GST pull down检测DNAJB13与HK1是否具有相互作用。结果成功构建p GEX-4T-1-Dnajb13重组质粒,测序结果与标准序列一致;转化重组质粒的大肠杆菌在37℃,
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