【摘 要】
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旨在制备伏马菌素B1单克隆抗体,并建立伏马菌素B1免疫学检测方法。以制备的免疫原FB1-BSA免疫小鼠,利用细胞融合技术建立能分泌抗FB1抗体的杂交瘤细胞株,体内诱生腹水的方法
【机 构】
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河南省农业科学院动物免疫学重点实验室,河南农业大学
【基金项目】
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公益性行业(农业)科研专项(201203040);河南省农业科学院优秀青年科技基金(2013YQ29)
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旨在制备伏马菌素B1单克隆抗体,并建立伏马菌素B1免疫学检测方法。以制备的免疫原FB1-BSA免疫小鼠,利用细胞融合技术建立能分泌抗FB1抗体的杂交瘤细胞株,体内诱生腹水的方法制备FB1单抗。基于制备的FB1单抗,建立间接竞争ELISA检测分析方法,并对检测方法性能进行了初步鉴定。结果表明,通过动物免疫、细胞融合筛选到1株分泌抗FB1抗体的杂交瘤细胞株3F6。建立的间接竞争ELISA检测分析方法检测范围40600 ng/mL之间,检测下限达到40 ng/mL,半数抑制浓度IC50为136.81 ng/mL,除与FB1特异性反应外,与同系物FB2及FB3交叉反应率分别为11.65%和7.85%,与黄曲霉毒素B1、黄曲霉毒素M1、β-玉米赤霉烯醇、呕吐毒素、T-2毒素、玉米赤酶烯酮、赭曲霉毒素A、玉米赤霉酮、α-玉米赤霉醇交叉反应率均低于0.2%,样品回收率在88.89%到115.45%之间,平均101.91%,变异系数为7.43%。本研究建立的ELISA方法与LC-MS-MS检测相同的样品时,二者的检测结果没有显著差异（P>0.05）。本研究初步研发出灵敏度符合检测要求、特异较强、准确度较高、简便快捷的FB1免疫学检测方法 。
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