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hCuZn-SOD基因的克隆、表达及其产物的初步纯化和表征

来源 :福州大学学报：自然科学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户：wuxiangff

【摘 要】

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为获得hCuZn-SOD基因，根据GenBank中人铜锌超氧化物歧化酶(hCuZn-SOD)基因碱基序列，设计扩增引物，用RT-PCR方法从人的肝细胞中克隆出hCuZn-SOD cDNA序列，并将它插入pUCm-T载体中，

【作 者】

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陈春 陈躬瑞 刘树滔 卢菀华 饶平凡 

【机 构】

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福州大学生物工程研究所

【出 处】

：

福州大学学报：自然科学版

【发表日期】

：

2004年6期

【关键词】

：

人铜/锌超氧化物歧化酶 克隆 RT-PCR 表达 融合蛋白 亲和层析 hCuZn-SOD clone RT-PCR expression fusion prot 

【基金项目】

：

福建省自然科学基金重点资助项目(2001F009),福州大学科技发展基金资助项目(XKJ(OD)-0132和2002-XY-11),福州大学人才基金资助项目(XJY-0214)

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为获得hCuZn-SOD基因，根据GenBank中人铜锌超氧化物歧化酶(hCuZn-SOD)基因碱基序列，设计扩增引物，用RT-PCR方法从人的肝细胞中克隆出hCuZn-SOD cDNA序列，并将它插入pUCm-T载体中，经过DNA序列测定证实，该片段序列的一个碱基发生突变(与报道基因相比)，引起其编码第116个氨基酸由G变为D．采用定向克隆的方法将hCuZn-SOD的cDNA片段克隆到表达载体pGEX-2T上，构建表达质粒pGEX-SOD，并转化大肠杆菌BL21(DE3)．SDS-PAGE分析证实，经I

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