【摘 要】
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建立了高效液相色谱/紫外法测定刺参组织全基因组DNA甲基化水平的方法,并运用此方法对喹(噁)啉药物处理过的刺参样品DNA甲基化水平进行分析.色谱条件为:色谱柱为ZORBAX SB-Aq
【机 构】
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山东省海洋资源与环境研究院,烟台山水海产有限公司,上海海洋大学食品学院
【基金项目】
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山东省科学技术发展计划项目;烟台市科技发展计划项目;国家海洋公益性行业科研专项;水生动物营养与饲料泰山学者岗位(2007-2012)
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建立了高效液相色谱/紫外法测定刺参组织全基因组DNA甲基化水平的方法,并运用此方法对喹(噁)啉药物处理过的刺参样品DNA甲基化水平进行分析.色谱条件为:色谱柱为ZORBAX SB-Aq(4.6 mm× 250mm;5μm);柱温为30℃;检测波长为280 nm;进样量20μL;流动相为甲醇-7 mmol/L乙酸铵(7∶93),流速为1.0 mL/min.5-甲基脱氧胞苷和脱氧胞苷的质量浓度在0.05 ～ 1.0 mg/L范围内时,线性关系良好,相关系数(r)均为0.999 9.5-甲基脱氧胞苷和脱氧胞苷的检出限均为0.05 mg/L,在加标浓度为0.05,0.25,1.0 mg/L时,回收率为90.4％ ～ 100.6％,批内、批间相对标准偏差均小于4％.采用CTAB法提取刺参组织DNA,酶解后进行HPLC测定,结果表明:喹(噁)啉药物处理过的组织样品DNA甲基化水平低于对照组,该类药物通过改变DNA甲基化水平而影响基因的正常表达,可能是其产生遗传毒性的一种机制,建立的方法可以很好地用于全基因组DNA总甲基化水平的检测.
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