【摘 要】
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进行了组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)突变体Reteplase(r-PA)基因的克隆,并在甲醇毕赤酵母(Pichia methanolica)中实现了胞外表达。以基因工程菌株里氏木霉(Trichodema reesei)306染色体D
【机 构】
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大连民族学院生命科学学院,齐齐哈尔大学生命科学与工程学院,天津科技大学生物工程学院
【基金项目】
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黑龙江省自然科学基金资助项目(D0352)
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进行了组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)突变体Reteplase(r-PA)基因的克隆,并在甲醇毕赤酵母(Pichia methanolica)中实现了胞外表达。以基因工程菌株里氏木霉(Trichodema reesei)306染色体DNA为模板,通过PCR技术克隆了r-PA基因,将扩增产物克隆到pMD18.T载体上并进行了序列测定。测序结果表明:克隆到的基因序列长1.1kb,与已发表的Reteplase基因同源性达99.91%,其编码的氨基酸顺序一致。文中还构建了甲醇毕赤酵母分泌性表达载体pMETαA-r
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