目的建立HPLC法测定注射用清开灵(冻干)(胆酸、猪去氧胆酸、水牛角等)中6种成分的含有量。方法腺苷、绿原酸、栀子苷含有量的测定采用XBridge C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);以乙腈-水(含0.1%甲酸)为流动相,梯度洗脱;体积流量1.0 m L/min;柱温30℃;检测波长254 nm。黄芩苷、猪去氧胆酸、胆酸含有量的测定采用XBridge C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);以甲醇-水(含0.1%甲酸)为流动相,梯度洗脱;体积流量1.0 m L/min;柱温35℃。结果 6种成分分别在2.244~56.108、2.658~66.445、4.347~108.682、122.01~1 016.75、131.94~1 099.50、152.22~1 268.50μg/m L范围内线性关系良好(r>0.999 0),平均加样回收率(RSD)分别为101.1%(0.46%)、98.0%(1.74%)、99.7%(0.15%)、100.9%(1.31%)、98.1%(0.18%)、98.2%(1.61%)。结论该方法稳定、重复性好,可用于注射用清开灵(冻干)的质量控制。