【摘 要】
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目的探讨脂多糖(LPS)建立内毒素血症小鼠模型中，LPS剂量和作用时间对肝脏胆汁酸转运体钠离子/牛磺胆酸共转运蛋白(Ntcp)和胆盐输出泵(Bsep)mRNA表达，以及肝功能的影响。方法128只雄性C57BL/6小鼠，腹腔注射LPS(剂量分别是5、10、20、40 mg/kg)，制作内毒素血症模型；并设生理盐水(NS)对照组、健康对照组；按给药后取材时间进一步分为24 h、48 h、72 h组，每
【机 构】
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200062 上海，上海交通大学附属儿童医院重症医学科,200062 上海，上海交通大学附属儿童医院重症医学科,200062 上海，上海交通大学附属儿童医院重症医学科,200062 上海，上海交通大学
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目的探讨脂多糖(LPS)建立内毒素血症小鼠模型中，LPS剂量和作用时间对肝脏胆汁酸转运体钠离子/牛磺胆酸共转运蛋白(Ntcp)和胆盐输出泵(Bsep)mRNA表达，以及肝功能的影响。
方法128只雄性C57BL/6小鼠，腹腔注射LPS(剂量分别是5、10、20、40 mg/kg)，制作内毒素血症模型；并设生理盐水(NS)对照组、健康对照组；按给药后取材时间进一步分为24 h、48 h、72 h组，每组8只。留取小鼠血液样本测定血清TBIL、TBA、ALT、AST水平，留取肝脏标本，实时荧光定量聚合酶链反应技术(RT-qPCR)测胆汁酸转运体Ntcp mRNA和Bsep mRNA表达量，苏木精-伊红(HE)染色观察肝组织病理学变化。各组间比较采用单因素方差分析，组间两两比较采用LSD-t检验进行统计。
结果(1)内毒素血症各组小鼠Ntcp mRNA、Bsep mRNA相对表达量在24～72 h内下降，24 h表达最低[LPS 5、10、20、40 mg/kg组Ntcp mRNA相对表达量分别为(0.64±0.02)、(0.53±0.14)、(0.25±0.09)、(0.15±0.07)，Bsep mRNA相对表达量分别为(0.74±0.12)、(0.58±0.11)、(0.41±0.09)、(0.27±0.11)]，并随着LPS剂量增加逐渐降低，24 h各组差异均有统计学意义(Ntcp mRNA、Bsep mRNA对应F＝5.29、F＝9.31，P＝0.04、P＝0.02)。(2)内毒素血症小鼠各组总胆红素(TBIL)、总胆汁酸(TBA)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)较对照组均升高(P<0.05)，24 h达峰值；其中40 mg/kg LPS处理后72 h较24 h均有显著降低，TBIL浓度为(1.29±0.25)μmol/L和(1.71±0.22)μmol/L ，TBA浓度为(6.97±0.98)μmol/L和(8.96±1.01)μmol/L ，ALT水平为(120.17±21.08)U/L和(179.22±16.57)U/L，AST水平为(360.34±35.31)U/L和(510.97±34.70)U/L，均P<0.05。(3)5、10 mg/kg LPS组小鼠24 h见肝组织疏松淡染，间质炎性细胞浸润，48 h及72 h见肝细胞嗜酸性变、空泡样变，炎性细胞浸润，胆小管增生；20、40 mg/kg LPS组小鼠各时间点均见肝组织结构改变，灶性坏死，间质炎症细胞浸润，胆小管增生、扩张。
结论内毒素血症肝损伤模型24 h时即出现Ntcp mRNA和Bsep mRNA表达下调，且随LPS剂量增加而加重，可能是内毒素肝损伤的重要机制。
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