论文部分内容阅读
目的：构建一个经HBsAg主动免疫的人lgG1抗体噬菌体展示文库，通过特异的淘筛(panning)获得与HBsAg有较高亲和力的Fab抗体，并测定其编码序列。方法：从一经乙肝疫苗免疫的自愿者的外周血分离淋巴细胞提取RNA，逆转录合成cDNA。PCR扩增重链Fd和κ轻链cDNA。依次将PCR产物克隆进载体pComb3H相应的位点，构建成噬菌体呈现库，并以HBsAg包被的96孔板对抗体库进行3轮淘筛，将所获克隆分别与HBsAg进行ELISA反应，挑取显色大于对照20倍以上的阳性克隆进行DNA测序。结果：lgG