重组人IL—18的高效表达、纯化及诱导KG—1细胞产生高水平IFN—γ

来源 :中国生物制品学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：Eltonxin

【摘要】

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目的研究IL-18在大肠杆菌中高效表达及纯化工艺，并诱导KG-1细胞产生IFN-γ。方法利用RT-nPCR从正常人胎肝组织中扩增获得人IL-18基因，克隆于pThiohisA载体，转化宿主菌BL-21，lmm

【作者】

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江宏映马雁冰等

【机构】

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中国医学科学院

【出处】

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中国生物制品学杂志

【发表日期】

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2002年1期

【关键词】

：

人IL-18 IFN-Γ KG-1细胞表达纯化诱导重组 rhIL-18 IFN-γ KG-1

【基金项目】

：

云南省面上项目基金资助课题（1999C0096M）

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目的研究IL-18在大肠杆菌中高效表达及纯化工艺，并诱导KG-1细胞产生IFN-γ。方法利用RT-nPCR从正常人胎肝组织中扩增获得人IL-18基因，克隆于pThiohisA载体，转化宿主菌BL-21，lmmol/LIPTG诱导，表达产物以包涵体形式存在，经2%TritonX-100洗涤，在8mol/L尿素下变性阴离子柱层析，透析复性后再经凝胶过滤纯化，通过纯化产物诱导人骨髓瘤单核细胞KG-1（ATCCCCL-246）产生IFN-γ，并检测其生物学活性，结果获得了在大肠杆菌中的稳定高效表达，表达的目

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