小鼠pαMHC-EGFP胚胎干细胞株的构建

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应用电穿孔方法将含有α肌球蛋白重链启动子的pαMHC-EGFP载体转染到D3系小鼠胚胎干细胞,应用200μg/m1新霉素进行药物选择.采用悬浮培养法,体外诱导分化心肌细胞.荧光显微镜下,观察到第7天和第8天拟胚体中出现"跳动"的心肌细胞并同时有绿色荧光蛋白的表达.同时与D3系小鼠胚胎干细胞比较心肌细胞分化率的变化无显著差异(P>0.05).该细胞株在分化心肌细胞的同时,具有绿色荧光蛋白的标记,因而利于对心肌细胞的识别和纯化.
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