MINDY2过表达慢病毒质粒的构建及其对肺癌A549细胞增殖、迁移和凋亡的影响

来源 :现代肿瘤医学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:szxszxszy
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:构建能表达MINDY2的慢病毒质粒,并获取稳定过表达MINDY2的A549细胞株,探讨过表达MINDY2对肺癌A549细胞增殖、迁移和凋亡的影响。方法:采用同源重组法构建pLVX-Flag-MINDY2过表达质粒,并通过菌落PCR和测序对重组质粒进行鉴定;在HEK293T细胞中瞬时转染pLVX-Flag-MINDY2质粒,通过Western blot实验检测Flag-MINDY2融合蛋白的表达;重组慢病毒载体包装HEK293T细胞,获取病毒上清液感染A549细胞,嘌呤霉素筛选后利用Western blot实验检测Flag-MINDY2融合蛋白的表达;CCK8实验、Transwell和划痕实验检测过表达MINDY2对A549细胞增殖和迁移能力的影响;流式细胞术检测细胞凋亡及周期变化。结果:测序结果证明成功构建了MINDY2过表达慢病毒载体;在HEK293T细胞中瞬时转染MINDY2重组质粒,能检测到Flag-MINDY2融合蛋白的表达;Western blot结果显示MINDY2在A549细胞中稳定过表达;CCK8实验表明过表达MINDY2能够抑制A549细胞的增殖;流式细胞术表明过表达MINDY2的A549细胞凋亡率显著升高,细胞周期被阻滞在G0/G1期;Transwell和划痕实验表明过表达MINDY2能够抑制A549细胞的迁移。结论:成功构建能高效表达MINDY2的慢病毒质粒和稳定表达MINDY2的A549细胞株;并且MINDY2能够抑制肺癌细胞系A549的增殖和迁移,促进细胞的凋亡。
其他文献
机械通气对于重症患者而言是最常用的生命支持手段之一,包括有创机械通气和无创机械通气。目前临床使用的机械通气模式有多种,而近些年来神经调节辅助通气(neurally adjusted ventilatory assist, NAVA)作为一种较为新颖的通气模式,依靠独特的吸气触发机制引起了与其相关的众多研究。本文就其在重症患者中的临床应用研究进展作一综述。
期刊
<正>党的十八大以来,以习近平同志为核心的党中央立足中华民族伟大复兴战略全局和世界百年未有之大变局,持续全面深入推进人才强国战略,高瞻远瞩谋划科技人才发展布局,不断完善党管人才工作格局。习近平总书记在2020年科学家座谈会、两院院士大会和中国科协第十次全国代表大会、2021年中央人才工作会议上先后发表重要讲话,为新时代人才事业发展指明了前进方向、提供了根本遵循。深刻学习领会习近平总书记重要讲话精神
期刊
目的 探讨微创后路腰椎椎间融合术(MIS-PLIF)和传统开放PLIF对腰椎退行性疾病(LDD)远期疗效及安全性的影响。方法 2011年1月—2014年12月收治LDD患者182例,其中96例采用传统开放PLIF治疗(PLIF组),86例采用MIS-PLIF治疗(MIS-PLIF组)。比较2组腰椎矢状位参数、多裂肌横截面积及萎缩率、融合率、疼痛视觉模拟量表(VAS)评分、日本骨科学会(JOA)评分
期刊
期刊
期刊
目的 探讨妊娠晚期孕妇抑郁在身体不满及母胎依恋间的中介效应。方法 便利选取2022年7—8月在郑州市某三级甲等医院产科门诊做产前常规检查的246例妊娠晚期的孕妇为研究对象。使用母胎依恋关系量表、孕期身体感受测评量表及爱丁堡产后抑郁量表对其进行调查。结果 妊娠晚期孕妇母胎依恋得分为(73.89±7.31)分、身体不满得分为(47.91±7.47)分、抑郁得分为(8.09±3.25)分。身体不满与抑郁
期刊
<正>9月17日,2022中国浙江·宁波人才科技周(以下简称“人才科技周”)开幕。省委常委、市委书记彭佳学在开幕式上指出,奋进在新的征程上,宁波肩负着为中国式现代化和共同富裕探路先行的重大责任,比以往任何时候都更加需要人才、渴求人才,也更能孕育人才、成就人才。他真诚希望广大人才将宁波作为第一选择,共享宁波争先进位的发展机遇,拥抱“与宁波共成长”的美好明天,开启“在宁波赢未来”的无限可能。向东是大海
期刊
在新形势下,不断探索“党建进公寓”育人新模式既是推动高校党建工作创新的重要举措,更是高校育人工作提质增效的重要抓手。本文结合高校工作实际,提出基于“1+1+1”党员服务平台的高校“党建进公寓”育人模式。
期刊
利用琼脂凝胶束缚离子的自由扩散,通过观察凝胶颜色的变化,实现离子定向移动路径的可视化,该电解池装置具有操作简单方便、实验现象明显、教师演示实验或学生实验均适宜等诸多优点。
期刊
<正>2023年3月2—3日,中国城市轨道交通协会信息化专业委员会第二届一次委员全体会议暨2022年度大会在广州隆重召开。中国城市轨道交通协会副会长李国勇、丁树奎,协会信息化专委会主任何霖、副主任邢智明以及来自全国70家信息化专委会委员单位代表参加,共商新时代轨道交通发展方向。会上,太原轨道集团报送的“太原轨道交通以低代码为核心的Paa S数字化底座建设实践”案例,荣获2021—2022年城市轨道
期刊