【摘 要】
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目的 研究供鼠周龄影响小鼠急性移植物抗宿主病(acute graft-versus-host disease,aGVHD)发生的内在机制.方法 采用2周龄、10周龄、18周龄C57BL/6(H-2Kb)雄性小鼠作为供鼠,8
【机 构】
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辽宁医学院沈阳军区总医院研究生培养基地,军事医学科学院基础医学研究所,天津医科大学总医院儿科
【基金项目】
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国家自然科学基金面上资助项目;国家自然科学基金青年基金资助项目;北京市自然科学基金面上资助项目;国家973计划资助项目
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目的 研究供鼠周龄影响小鼠急性移植物抗宿主病(acute graft-versus-host disease,aGVHD)发生的内在机制.方法 采用2周龄、10周龄、18周龄C57BL/6(H-2Kb)雄性小鼠作为供鼠,8周龄的BALB/c(H-2Kd)雄性小鼠作为受鼠,建立小鼠aGVHD模型.经60 Coγ射线照射后,给予模型组小鼠输注不同周龄供鼠的骨髓细胞(1×107/只)和脾细胞(1×10 7/只),观察各组小鼠的一般生存情况与病理学改变;采用实时荧光定量PCR技术(Q-PCR)检测炎性因子IL-1β、TNF-α、IL-17A在各组小鼠脾脏表达的改变;流式细胞术分析各周龄供者小鼠骨髓造血干细胞和脾脏细胞中免疫细胞亚群所占比例.结果 成功建立不同周龄供者小鼠aGVHD模型,与2周龄和10周龄供者组相比,18周龄供者组移植后一般生存情况和病理学改变最显著;Q-PCR检测结果显示,移植后第10天模型组开始出现炎性因子表达的改变,2周龄组各种炎性因子的表达量最低,18周龄组表达量最高,且组间比较差异具有统计学意义(P<0.05).流式细胞术分析不同周龄供鼠造血干细胞含量和免疫细胞亚群的比例,结果表明,随着供者周龄的增加,骨髓中造血干细胞的含量亦减少;而脾脏细胞中成熟树突状细胞(DC)、活化T细胞则随着年龄的增长而增加,但髓源性抑制细胞则随着小鼠周龄的增长其所占比例显著下降.结论 不同周龄供鼠体内造血干细胞含量和免疫细胞成分的不同是影响受鼠aGVHD发生的主要因素.
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