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[摘要] 目的 探讨Bcl-2、IGF-2蛋白在子宫肌瘤组织中的表达及与子宫肌瘤发病的相关性。 方法 采用免疫组织化学SP法，检测子宫肌瘤组织及正常子宫肌层组织中Bcl-2、IGF-2蛋白的表达情况，并采用Pearson相关分析法分析Bcl-2、IGF-2蛋白与子宫肌瘤发生的相关性。 结果 Bcl-2、IGF-2蛋白在子宫肌瘤组织中的阳性表达率明显高于正常子宫肌层组织，两者在子宫肌瘤组织中的阳性表达率分别为（100%、95%）高于在正常肌层组织的表达（21.21%、25.00%）。 结论 在子宫肌瘤组织中Bcl-2呈过度表达，IGF-2表达也上调，表明Bcl-2、IGF-2蛋白表达的增多可诱导肌瘤的发生。
[关键词] Bcl-2；IGF-2；子宫肌瘤
[中图分类号] R737.33 [文献标识码] B [文章编号] 1673-9701（2013）13-0013-02
子宫肌瘤是女性生殖系统常见的一种性激素依赖性疾病，大多数患者无症状，或有轻微的盆腔疼痛、经期延长、月经量增多等临床表现，因此临床报道的发病率远较真实的发病率低[1]。目前关于子宫肌瘤的发病机制尚不十分清楚，有关于PTEN基因、瘦素、Survivin等在子宫肌瘤组织中表达的研究。有研究表明，胰岛素样生长因子-2（IGF-2）基因的过度表达可以导致乳腺癌、肝癌等多种肿瘤的发生发展[2]。另有研究表明Bcl-2可以表达在子宫肉瘤中，呈局灶性或散在分布。为进一步探讨上述两种因子在子宫肌瘤发病中的可能机制，我们做了下述研究，现报道如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料
随机选择2011年8～12月就诊于我院妇科病房因子宫肌瘤而切除的子宫标本40例为研究组，术后经病理检查证实为子宫肌瘤；选取同期因器官脱垂等非肿瘤因素而行子宫部分或全部切除的标本40例作为对照组，同样经病理检查证实为正常平滑肌组织。研究组患者年龄35～58岁，获取的标本均经患者知情同意。
1.2 测定方法
采用免疫组化SP法检测组织中Bcl-2、IGF-2蛋白的表达。多克隆抗体购于武汉博士德生物工程有限公司；SP试剂盒购于北京中杉生物技术有限公司。
1.3 结果判定
严格按照试剂盒说明书的诊断标准执行。即细胞浆内出现棕黄色颗粒为Bcl-2、IGF-2阳性。根据染色强度与阳性细胞百分比分为4个等级：0～1分为阴性（-），2分为弱阳性（ ），3～4分为阳性（ ），5～7分为强阳性（ ）。染色强度阴性为0分，染色强度中等为2分，介于两者之间为1分，染色强者为3分；染色阳性细胞数<5%为阴性（0分），5%～25%为弱阳性（1分），26%～50%为阳性（2分），51%～75%为强阳性（3分），>75%为强强阳性（4分）。按综合评分的等级来评价两种蛋白的表达情况。
1.4 统计学方法
应用SPSS12.0软件进行数据分析。阳性表达率的比较采用χ2检验，相关性分析采用Pearson相关进行。
2 结果
2.1 Bcl-2、IGF-2蛋白在子宫肌瘤组织及正常肌层组织中的表达
子宫肌瘤组织中Bcl-2蛋白的阳性表达率为100%，IGF-2蛋白的阳性表达率为95%，均高于正常肌层组织中的阳性表达率（分别为21.21%、25.00%）。Bcl-2蛋白在子宫肌瘤组织及正常子宫肌层组织中表达率[12.862（v=1），P < 0.01]，差异具有统计学意义；IGF-2蛋白在子宫肌瘤组织及正常子宫肌层组织中表达率[5.000（v=1），P < 0.05]，差异具有统计学意义。
2.2 Bcl-2、IGF-2蛋白与子宫肌瘤发生的相关性分析
Bcl-2蛋白的表达与子宫肌瘤的发生作相关性分析，得出相关系数为r = 0.096 9；IGF-2蛋白的表达与子宫肌瘤的发生得出相关系数为r = 0.941，两种蛋白的表达与子宫肌瘤的发生呈正相关，经检验P < 0.05，差异有统计学意义。
3 讨论
目前广泛认为子宫肌瘤生长的主要促进剂为性激素，外源性激素的应用可使肌瘤体积增大，降低激素浓度可使肌瘤体积减小，并缓解其临床症状[3]。迄今为止其发病机制以及发生发展的分子生物学基础尚不明确，环境因素及基因突变可能参与了子宫肌瘤的发生发展。
IGF-2是目前所知功能最复杂的生长调控因子，通过其重要的生物学作用引起细胞的增殖和分化[4]。IGF-2同时也是一种具有强大自分泌和旁分泌作用的有丝分裂原，可促进正常细胞的生长发育及促进胚胎的形成。目前的研究已经证实IGF-2的过度表达可以导致乳腺癌的发生，高伟[5]等研究表明IGF-2在乳腺癌组织中的表达明显高于乳腺纤维腺瘤及乳腺增生的组织。本研究中发现在子宫肌瘤患者中IGF-2也呈过度表达，阳性表达率达95%，与正常子宫肌层组织中IGF-2的阳性表达率相比，差异具有统计学意义。
bcl-2是bcl-2基因家族中的原癌基因之一，可以抑制肿瘤细胞的凋亡，与其他癌基因如p53等共同控制着细胞的生长、分化、增生和凋亡[6]。有研究表明，肿瘤细胞中bcl-2的过表达可以抑制程序性细胞死亡和使肿瘤细胞产生耐药性[7]。本研究中Bcl-2在子宫肌瘤组织中阳性表达率达100%，在正常肌层组织中阳性表达率为21.21%，两者比较差异具有统计学意义。上述两种蛋白与子宫肌瘤的发生行相关性分析得出，Bcl-2、IGF-2蛋白与子宫肌瘤的发生呈正相关。但是子宫肌瘤存在异质性的遗传背景，本实验并未阐明，有待于后续研究。
[参考文献]
[1] 乐杰. 妇产科学[M]. 第6版. 北京：人民卫生出版社，2004：295.
[2] 史艳平，封全灵. 子宫肌瘤组织中TSP-1和IGF-2蛋白的表达及意义[J]. 山东医药，2011，51（4）：92-93.
[3] Morikawa A，Ohara N，Nakabayashi K，et al. Selective progesterone receptor modulator asoprisnil down-regulates collagen synthesis in cultured human uterine leiomyoma cells through up-regulating extracellular matrix metalloproteinase inducer[J]. Human Reproduction，2008，23（4）：944-951.
[4] Kim HJ，Kim TY. Regulation of vascular endothelial growth factor expression by insulin-like growth factor-II in human keratinocytes，differential involvement of mitogen-activated protein kinases and feedback inhibition of protein kinase C[J]. Br J Dermatol，2005，152（3）：418-425.
[5] 高伟，李连宏，等. IGF-2、Ki-67在乳腺癌中的表达及其意义[J]. 大连医科大学学报，2010，32（1）：22-25.
[6] Reed JC. Bcl-2 and the regulation of programmed cell death[J]. J Cell Biol，1994，124（1）：1-6.
[7] Jiang H，Xia D，Wu LJ，et al. Inhibition of Bcl-2 enhances the efficacy of epirubicin chemotherapy in PC-3 prostate cancer cells[J]. Chin Med J（Engl），2011，124（23）：4018-4021.
（收稿日期：2013-01-18）
[关键词] Bcl-2；IGF-2；子宫肌瘤
[中图分类号] R737.33 [文献标识码] B [文章编号] 1673-9701（2013）13-0013-02
子宫肌瘤是女性生殖系统常见的一种性激素依赖性疾病，大多数患者无症状，或有轻微的盆腔疼痛、经期延长、月经量增多等临床表现，因此临床报道的发病率远较真实的发病率低[1]。目前关于子宫肌瘤的发病机制尚不十分清楚，有关于PTEN基因、瘦素、Survivin等在子宫肌瘤组织中表达的研究。有研究表明，胰岛素样生长因子-2（IGF-2）基因的过度表达可以导致乳腺癌、肝癌等多种肿瘤的发生发展[2]。另有研究表明Bcl-2可以表达在子宫肉瘤中，呈局灶性或散在分布。为进一步探讨上述两种因子在子宫肌瘤发病中的可能机制，我们做了下述研究，现报道如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料
随机选择2011年8～12月就诊于我院妇科病房因子宫肌瘤而切除的子宫标本40例为研究组，术后经病理检查证实为子宫肌瘤；选取同期因器官脱垂等非肿瘤因素而行子宫部分或全部切除的标本40例作为对照组，同样经病理检查证实为正常平滑肌组织。研究组患者年龄35～58岁，获取的标本均经患者知情同意。
1.2 测定方法
采用免疫组化SP法检测组织中Bcl-2、IGF-2蛋白的表达。多克隆抗体购于武汉博士德生物工程有限公司；SP试剂盒购于北京中杉生物技术有限公司。
1.3 结果判定
严格按照试剂盒说明书的诊断标准执行。即细胞浆内出现棕黄色颗粒为Bcl-2、IGF-2阳性。根据染色强度与阳性细胞百分比分为4个等级：0～1分为阴性（-），2分为弱阳性（ ），3～4分为阳性（ ），5～7分为强阳性（ ）。染色强度阴性为0分，染色强度中等为2分，介于两者之间为1分，染色强者为3分；染色阳性细胞数<5%为阴性（0分），5%～25%为弱阳性（1分），26%～50%为阳性（2分），51%～75%为强阳性（3分），>75%为强强阳性（4分）。按综合评分的等级来评价两种蛋白的表达情况。
1.4 统计学方法
应用SPSS12.0软件进行数据分析。阳性表达率的比较采用χ2检验，相关性分析采用Pearson相关进行。
2 结果
2.1 Bcl-2、IGF-2蛋白在子宫肌瘤组织及正常肌层组织中的表达
子宫肌瘤组织中Bcl-2蛋白的阳性表达率为100%，IGF-2蛋白的阳性表达率为95%，均高于正常肌层组织中的阳性表达率（分别为21.21%、25.00%）。Bcl-2蛋白在子宫肌瘤组织及正常子宫肌层组织中表达率[12.862（v=1），P < 0.01]，差异具有统计学意义；IGF-2蛋白在子宫肌瘤组织及正常子宫肌层组织中表达率[5.000（v=1），P < 0.05]，差异具有统计学意义。
2.2 Bcl-2、IGF-2蛋白与子宫肌瘤发生的相关性分析
Bcl-2蛋白的表达与子宫肌瘤的发生作相关性分析，得出相关系数为r = 0.096 9；IGF-2蛋白的表达与子宫肌瘤的发生得出相关系数为r = 0.941，两种蛋白的表达与子宫肌瘤的发生呈正相关，经检验P < 0.05，差异有统计学意义。
3 讨论
目前广泛认为子宫肌瘤生长的主要促进剂为性激素，外源性激素的应用可使肌瘤体积增大，降低激素浓度可使肌瘤体积减小，并缓解其临床症状[3]。迄今为止其发病机制以及发生发展的分子生物学基础尚不明确，环境因素及基因突变可能参与了子宫肌瘤的发生发展。
IGF-2是目前所知功能最复杂的生长调控因子，通过其重要的生物学作用引起细胞的增殖和分化[4]。IGF-2同时也是一种具有强大自分泌和旁分泌作用的有丝分裂原，可促进正常细胞的生长发育及促进胚胎的形成。目前的研究已经证实IGF-2的过度表达可以导致乳腺癌的发生，高伟[5]等研究表明IGF-2在乳腺癌组织中的表达明显高于乳腺纤维腺瘤及乳腺增生的组织。本研究中发现在子宫肌瘤患者中IGF-2也呈过度表达，阳性表达率达95%，与正常子宫肌层组织中IGF-2的阳性表达率相比，差异具有统计学意义。
bcl-2是bcl-2基因家族中的原癌基因之一，可以抑制肿瘤细胞的凋亡，与其他癌基因如p53等共同控制着细胞的生长、分化、增生和凋亡[6]。有研究表明，肿瘤细胞中bcl-2的过表达可以抑制程序性细胞死亡和使肿瘤细胞产生耐药性[7]。本研究中Bcl-2在子宫肌瘤组织中阳性表达率达100%，在正常肌层组织中阳性表达率为21.21%，两者比较差异具有统计学意义。上述两种蛋白与子宫肌瘤的发生行相关性分析得出，Bcl-2、IGF-2蛋白与子宫肌瘤的发生呈正相关。但是子宫肌瘤存在异质性的遗传背景，本实验并未阐明，有待于后续研究。
[参考文献]
[1] 乐杰. 妇产科学[M]. 第6版. 北京：人民卫生出版社，2004：295.
[2] 史艳平，封全灵. 子宫肌瘤组织中TSP-1和IGF-2蛋白的表达及意义[J]. 山东医药，2011，51（4）：92-93.
[3] Morikawa A，Ohara N，Nakabayashi K，et al. Selective progesterone receptor modulator asoprisnil down-regulates collagen synthesis in cultured human uterine leiomyoma cells through up-regulating extracellular matrix metalloproteinase inducer[J]. Human Reproduction，2008，23（4）：944-951.
[4] Kim HJ，Kim TY. Regulation of vascular endothelial growth factor expression by insulin-like growth factor-II in human keratinocytes，differential involvement of mitogen-activated protein kinases and feedback inhibition of protein kinase C[J]. Br J Dermatol，2005，152（3）：418-425.
[5] 高伟，李连宏，等. IGF-2、Ki-67在乳腺癌中的表达及其意义[J]. 大连医科大学学报，2010，32（1）：22-25.
[6] Reed JC. Bcl-2 and the regulation of programmed cell death[J]. J Cell Biol，1994，124（1）：1-6.
[7] Jiang H，Xia D，Wu LJ，et al. Inhibition of Bcl-2 enhances the efficacy of epirubicin chemotherapy in PC-3 prostate cancer cells[J]. Chin Med J（Engl），2011，124（23）：4018-4021.
（收稿日期：2013-01-18）