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目的探讨诸暨地区产超广谱β-内酰胺酶(extended spectrumβ-lactamases,ESBLs)的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的现状及耐药性。方法收集2016年1月-2017年12月间诸暨地区诸暨市第四人民医院、诸暨市中心医院以及诸暨市人民医院临床微生物实验室分离的大肠埃希菌(Escherichia,E.coli)549株,肺炎克雷伯菌(Klebsiella,K.pneumoniae)415株,采用美国临床和微生物标准化实验室CLSI推荐的纸片进行ESBLs确证试验,并依照美国临床和微生物标准化实验室CLSI和卫生部全国耐药监测中心推荐方法检测其对16种抗菌药物的耐药性。结果 2016年检出264株E.coli,产ESBLs菌检出率为51.89%;2017年检出285株E.coli,产ESBLs菌检出率为40.00%。2016年检出189株的K.pneumoniae,产ESBLs菌检出率为21.16%;2017年检出226株的K.pneumoniae,产ESBLs菌检出率为18.58%。2016-2017年E.coli和K.pneumoniae产ESBLs检出率在各类标本中的分布基本相似,E.coli产ESBLs检出率以尿标本为最高,K.pneumoniae产ESBLs检出率以痰标本为最高,血和腹腔引流液次之,其它一些来源的标本均有检出。2016-2017年E.coli和K.pneumoniae的产ESBLs菌株对16种抗菌药物耐药率均明显高于非产ESBLs菌株(P<0.05)。2016年E.coli产ESBLs菌株耐药率超过90%的抗菌药有氨苄西林、头孢吡肟、头孢呋辛、头孢曲松、头孢噻肟。耐药率在15%以下的抗菌药物主要有哌拉西林/他唑巴坦、阿米卡星、头孢哌酮/舒巴坦、亚胺培南。2016年K.pneumoniae产ESBLs菌株耐药率超过90%的抗菌药有氨苄西林、头孢吡肟、头孢呋辛、头孢曲松、头孢噻肟、头孢他啶;耐药率在15%以下的抗菌药物主要有阿米卡星、头孢哌酮/舒巴坦、亚胺培南。2017年E.coli和K.pneumoniae产ESBLs菌株耐药率与2016年大致相似。结论 2016-2017年诸暨地区产ESBLs的E.coli和K.pneumoniae菌株检出率仍较高,且表现为多重耐药,其中头孢菌素类药物的耐药率呈上升趋势;而酶抑制剂抗菌药物的耐药率保持在一个相对稳定的水平,临床应合理使用抗生素。