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目的:建立可受强力霉素调控的高表达外源基因的真核表达体系ALC—pTet—on Advanced细胞株,用于基因功能的研究。方法:将质粒pTet—on Advanced转染至成釉细胞系(ALC),用1000μg/mL的G418筛选抗性克隆。用RT—PCR进行DNA的整合鉴定,并瞬时转染荧光素报告基因(pTRE—Tight—Luc)对pTet—on Advanced阳性克隆株的功能进行鉴定。结果:G418压力筛选后,获得了13个细胞克隆株,RT—PCR检测均表达反义四环素转录激活子(rtTA Advance