【摘 要】
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目的构建重组人源GRM4基因慢病毒载体,筛选稳定表达GRM4蛋白的乳腺癌MDA-MB-231细胞株。方法 PCR扩增GRM4基因片段,扩增产物连接到带有绿色荧光蛋白GFP的慢病毒载体表达质粒
【基金项目】
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2017年度军队后勤科研项目(编号:CWH17C017),2018年度广州市科技计划项目(编号:201804010186).
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目的构建重组人源GRM4基因慢病毒载体,筛选稳定表达GRM4蛋白的乳腺癌MDA-MB-231细胞株。方法 PCR扩增GRM4基因片段,扩增产物连接到带有绿色荧光蛋白GFP的慢病毒载体表达质粒中,构建重组荧光慢病毒质粒GFP-GRM4,同时以慢病毒空载体作为阴性对照组;将GFP-GRM4与包装质粒p MD2. G、ps PAX2共转染293T包装细胞中,24 h后观察荧光表达情况及被感染细胞的形态;48 h后收集病毒上清液,以病毒上清液感染乳腺癌MDA-MB-231细胞,利用嘌呤霉素抗性筛选稳定表达GRM4
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