对《硫乙醇酸盐流体培养基灵敏度检查(草案)》的验证试验

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目的:对新提出的《硫乙醇酸盐流体培养基灵敏度检查(草案)》的准确性、可操作性和可重复性进行验证。方法:将质控菌乙型溶血性链球菌、生孢子梭状芽孢杆菌(简称生孢梭菌)、短芽孢杆菌接种于适宜的培养基培养,取新鲜培养物用0.9% 无菌氯化钠制成浊度稍高于标准比浊管的均匀菌液,然后分别用0.9%无菌氯化钠溶液进行系列稀释至约相当于10-100 CFU·mL-1,作为工作菌液。取上述工作菌液分别接种于3管(1 mL·管-1)硫乙醇酸盐流体培养基中,置35℃培养72h(短芽孢杆菌培养5 d)。同时将上述工作菌液进行CFU·mL-1计数:将乙型溶血性链球菌和短芽孢杆菌采用涂抹法分别接种于血琼脂培养基和营养琼脂培养基,置有氧条件35℃培养24h,生孢梭菌采用浇注法接种于生孢梭菌CFU计数培养基,置厌氧条件35℃培养18-20 h,用未接种的培养基作为空白对照。结果:当上述3种质控菌工作菌液的平皿CFU计数在10-100 CFU·mL-1时,其接种的3管硫乙醇酸盐流体培养基均呈现生长。结论:新提出的《硫乙醇酸盐流体培养基灵敏度检查(草案)》准确性、可操作性和重复性良好,易于推广和实施。可以提出作为对中国药典(2005年版)中硫乙醇酸盐流体培养基灵敏度检查的修订草案。
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