岸蟹金属硫蛋白在大肠杆菌BL21中的表达

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目的:在大肠杆菌BL21中表达岸蟹金属硫蛋白基因,建立金属硫蛋白原核表达的流程.方法:将重组质粒pET-GST-R转化至大肠杆菌,经PCR扩增和酶切检测,得到含重组质粒pET-GST-R的工程菌.结果:从IPTG浓度、IPTG诱导时间、金属离子浓度等几个方面摸索诱导金属硫蛋白表达的条件,表达出分子量约为33kD的融合蛋白.结论:成功制备金属硫蛋白的工程菌菌株.金属硫蛋白对大肠杆菌细胞毒性很大,培养基需添加金属离子.
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