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图像自动聚焦评价函数的选择是全自动控制显微镜无源方式自动聚焦系统的关键问题。对几种主要的图像聚焦评价函数 (灰度方差算子、灰度梯度算子、能量谱方法等 )进行了比较、研究 ,并在此基础上首次将改进的 L aplacian算子作为聚焦评价函数引入自动聚焦之中 ,同时为了消除噪声的影响 ,引入了步长和阈值两个参数。实验结果表明 ,改进的L aplacian算子比其他评价函数更为准确、稳定和可靠 ,该算法已成功应用于显微镜自动调焦系统中