结核分枝杆菌HSP65-hIL-2融合基因稳定转染细胞系的建立

来源 :科学技术与工程 | 被引量 : 0次 | 上传用户：orallove

【摘要】

：

建立可稳定表达结核分枝杆菌HSP65-hIL-2融合蛋白的稳定转染P815细胞系。在阳离子脂质体作用下,将HSP65-hIL-2真核表达质粒转染与BALB/c遗传背景一致的P815细胞（H-2^d）。G418筛

【作者】

：

王丽梅徐志凯柏银兰张薇康健师长宏

【机构】

：

第四军医大学基础部微生物学教研室,第四军医大学实验动物中心

【出处】

：

科学技术与工程

【发表日期】

：

2009年11期

【关键词】

：

结核分枝杆菌稳定转染 HSP65 HIL-2 My cobacterium tuberculosis stably transfected HSP65-hIL

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建立可稳定表达结核分枝杆菌HSP65-hIL-2融合蛋白的稳定转染P815细胞系。在阳离子脂质体作用下,将HSP65-hIL-2真核表达质粒转染与BALB/c遗传背景一致的P815细胞（H-2^d）。G418筛选阳性克隆,RT-PCR和间接免疫荧光法检测目的蛋白的转录和表达。阳性克隆细胞经RT-PCR检测到HSP65-hIL-2融合基因特异性的mRNA表达;用鼠抗人的IL-2mAb进行间接免疫荧光检测,可在转染的P815细胞浆中观察到较强的绿色特异性荧光,而未转染细胞则为阴性。成功获得稳定表达HSP65-

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