原癌基因USP22启动子的克隆及转录活性分析

来源 :中国医科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：xbh0820

【摘要】

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目的克隆原癌基因USP22部分启动子序列,探讨其转录活性。方法应用cDNA5′末端快速扩增（5′RACE）方法定位USP22基因转录起始点;在此基础上针对其5′端非编码区处包括转录起始点

【作者】

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熊建军周英妹干丽君龚帧林玲

【机构】

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九江学院基础医学院药理教研室,江西省高等学校系统生物学临床应用重点实验室

【出处】

：

中国医科大学学报

【发表日期】

：

2011年7期

【关键词】

：

USP22基因启动子报告基因 USP22 gene promoter report gene

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目的克隆原癌基因USP22部分启动子序列,探讨其转录活性。方法应用cDNA5′末端快速扩增（5′RACE）方法定位USP22基因转录起始点;在此基础上针对其5′端非编码区处包括转录起始点在内的-2828-＋52片段进行PCR扩增,产物克隆入荧光素酶表达载体pGL3-Basic。重组质粒与内参质粒pRL-TK共转染HepG2与Hela细胞,双荧光素酶活性检测确定其转录活性。结果成功确定USP22基因转录起始位点,酶切及测序结果证实USP22基因5′端非编码区2880bp序列正确插入到荧光素酶报告基因载体pG

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