【摘 要】
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目的探讨外源性硫化氢减轻人脐静脉平滑肌细胞(HVSMCs)钙化的机制。方法采用组织块重复贴壁法培养原代HVSMCs,经免疫细胞化学法鉴定后,将细胞随机分为对照组、高磷组(12mmol
【机 构】
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宁夏医科大学基础医学院病理生理学系
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目的探讨外源性硫化氢减轻人脐静脉平滑肌细胞(HVSMCs)钙化的机制。方法采用组织块重复贴壁法培养原代HVSMCs,经免疫细胞化学法鉴定后,将细胞随机分为对照组、高磷组(12mmolβ-GP)、高磷+Na HS组(8.0×10-6mol Na HS)、高糖组(25mmol D-葡糖糖)、高糖+Na HS组(8.0×10-6mol Na HS)。采用茜素红S染色法定性检测平滑肌细胞钙化程度;MTT法检测细胞存活率;比色法检测细胞内钙含量、碱性磷酸酶(ALP)活性、丙二醛(MDA)含量及总超氧化物歧化酶(T-SOD)活力;DCFH-DA荧光标记染色法检测细胞活性氧(ROS)水平。结果 MTT结果显示,与正常组相比,高磷和高糖均使细胞存活率下降(P均<0.05),而加入Na HS干预的两组细胞存活率基本恢复至正常组水平。与正常组相比,高磷组和高糖组钙沉积明显增加,胞内钙含量、ALP活性显著升高(P<0.05),氧化应激指标ROS增加、MDA含量升高(P<0.05),而抗氧化应激指标T-SOD活力下降(P<0.05)。而分别加Na HS干预的两组细胞,与高磷组和高糖组相比钙沉积减轻,钙含量、ALP活性、ROS、MDA回升(P<0.05),而T-SOD活力升高(P<0.05)。结论外源性硫化氢部分通过对抗氧化应激而减轻血管平滑肌细胞钙化。
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