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目的
观察CD3单克隆抗体(CD3mAb)、佛波醇酯+离子霉素(PMA+IM)、结核杆菌低分子多肽抗原(Mtb-Ag)活化CD3+ T细胞CD69分子的表达情况。
方法分离获取健康人外周血单个核细胞(PBMC),用CD3mAb(A组)、PMA+IM(B组)、Mtb-Ag(C组)刺激PBMC,采用流式细胞术检测CD3+ T细胞和γδΤ细胞0、6、12、24、48和72 h CD69分子的动态表达情况。
结果CD3+ T细胞CD69分子的动态表达情况:CD3mAb刺激组24 h达高峰,为56.2%;PMA+IM刺激组6 h达高峰,为99.5%;Mtb-Ag刺激组24 h达高峰,为16%。各组比较F=322.528,P<0.001;两两比较,均P<0.001。γδΤ细胞CD69分子的动态表达情况:CD3mAb刺激组24 h达高峰,为55.1%;PMA+IM刺激组6 h达高峰,为99.3%;Mtb-Ag刺激组24 h达高峰,为75.2%。各组比较F=21.170,P<0.001;两两比较:CD3mAb与PMA+IM组比较,PMA+IM组与Mtb-Ag组比较,均P<0.001;Mtb-Ag与CD3mAb比较P=0.646。
结论PMA+IM的刺激,CD3+ T细胞和γδΤ细胞活化达高峰的用时比CD3mAb、Mtb-Ag的刺激要短,CD69的表达率也比CD3mAb、Mtb-Ag的刺激要高,应作为三种方法中CD3+ T细胞活化的首选方法。