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以pPICZαB为载体，应用RT-PCR从感染D2V的C6/36病变细胞中克隆全长E基因，电转化法将重组质粒整合入巴斯德毕赤氏酵母菌，经抗生素筛选、表型鉴定和PCR分析得到Mut^+型的多拷贝整合菌，经甲醇诱导培养可产生69KD的融合蛋白，与含组氨酸尾的D2V包膜糖蛋白分子量理论值相符；免疫印迹证实该表达产物可与D2V E特异性单抗和D2V多抗进行反应；表达产物经金属螯合亲和层析可获得纯化的含组氨酸尾的E融合蛋白并保留其免疫反应性。研究显示克隆的全长D2V E基因可在毕赤氏酵母菌中高效分泌表达，E融合蛋白