【摘 要】
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目的 探讨积雪草苷对骨髓间充质干细胞（bone marrow mesenchymal stem cells, BMSCs）成骨分化的诱导作用以及潜在机制。方法 使用6个浓度的积雪草苷（0、5、10、20、30、40μmoL/L）作用BMSCs,利用CCK-8与检测细胞增殖率与细胞凋亡率，筛选出积雪草苷对BMSCs最大无毒浓度。将BMSCs分成3组，空白对照组、积雪草苷组与抑制组，空白对照组正常培养
【基金项目】
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青海省科技计划应用基础研究计划课题（2020-ZJ-755）；
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目的 探讨积雪草苷对骨髓间充质干细胞（bone marrow mesenchymal stem cells, BMSCs）成骨分化的诱导作用以及潜在机制。方法 使用6个浓度的积雪草苷（0、5、10、20、30、40μmoL/L）作用BMSCs,利用CCK-8与检测细胞增殖率与细胞凋亡率，筛选出积雪草苷对BMSCs最大无毒浓度。将BMSCs分成3组，空白对照组、积雪草苷组与抑制组，空白对照组正常培养，积雪草苷组使用积雪草苷对BMSCs进行诱导成骨分化，抑制组在此基础上加用SB-431542（50 moL/L）处理。诱导12 d后，茜素红染色观察细胞中矿化结节的数量，RT-qPCR检测细胞中碱性磷酸酶（ALP）、骨桥蛋白（OPN）和骨钙素（OCN）基因表达水平，Western blot检测细胞中转化生长因子-β1（TGF-β1）、Smad2、p-Smad2、Smad3和p-Smad3蛋白表达水平。结果 20μmoL/L的积雪草苷对BMSCs无明显抑制效果。与空白对照组相比，积雪草苷促进BMSCs钙化结节形成增多，ALP、OPN和OCN基因表达水平升高，TGF-β1、p-Smad2和p-Smad3蛋白表达水平升高（均P＜0.05）;积雪草苷在TGF-β/Smads通路被抑制的情况下仍然能发挥诱导BMSCs成骨分化作用。结论 积雪草苷具有诱导骨髓间充质干细胞成骨分化的潜力，可能涉及的机制为激活细胞中TGF-β/Smads通路，上调OPN、ALP与OCN基因表达量，帮助骨髓间充质干细胞完成成骨分化。
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