【摘 要】
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目的构建人源性Rab32荧光融合蛋白表达载体p EGFP-Rab32,并观察Rab32在人黑素细胞瘤细胞系A375中细胞定位情况。方法收集并提取A375细胞中的总RNA,反转录成c DNA,以特异性引
【机 构】
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华中科技大学同济医学院附属同济医院皮肤科,华中科技大学同济医学院附属同济医院麻醉科
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目（编号：81371728,81472864）
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目的构建人源性Rab32荧光融合蛋白表达载体p EGFP-Rab32,并观察Rab32在人黑素细胞瘤细胞系A375中细胞定位情况。方法收集并提取A375细胞中的总RNA,反转录成c DNA,以特异性引物扩增Rab32片段,经Xho I和Kpn I双酶切聚合酶链反应（PCR）产物和p EGFP-C3表达载体,酶切产物经胶回收、连接后转化至感受态大肠杆菌DH5a中,挑取单克隆菌落进行菌液PCR鉴定、酶切鉴定和测序分析,以确定表达载体构建正确。将构建的重组质粒转染A375细胞,Western blot检测细胞中
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