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建立一种简单、快速的反相高效液相色谱(RP-HPLC)法测定穿心莲、路边青配伍药液中脱水穿心莲内酯在小鼠血浆中的浓度.使用C18反相柱(4.0 mm×250 mm,5 μm),流动相为甲醇-乙腈-水(13∶17∶70),流速:1.0 mL*min-1,检测波长:252 nm.血药浓度在0.102～20.305 mg*L-1(r=0.999 8)时线性关系良好;低、中、高浓度下的回收率、重现性均符合方法学要求.该方法能有效地监测小鼠血浆中脱水穿心莲内酯的浓度变化.