志贺氏菌属和侵袭大肠杆菌基因探针的克隆

来源 :中华微生物学和免疫学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:danan1234
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本文从志贺氏菌属弗氏5(M90T)分离纯化140Mdal大质粒,然后用EcoR1酶解,进行琼脂糖凝胶电泳,从凝胶中回收与侵袭有关的17kb EcoR1片段。将这17kb片段与已用碱性磷酸脂酶处理过的pBR325重组,转化大肠杆菌C600,筛选出包含这17 kb片段的重组质粒(pSF001)。然后再从该重组质粒pSF001切取17kb片段,将它制成基因探针,该探针与四种志贺氏痢疾杆菌和侵袭大肠杆菌杂交呈阳性反应,与霍乱弧菌、鼠伤寒沙门氏菌、大肠杆菌和LT+ST+的大肠杆菌不同源。实验结果表明,该基因探针具有灵敏度高、特异性好的优点,它不仅在实验室内可用于初筛包含侵袭基因的克隆,而且可用于临床诊断和流行病学调查。

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期刊
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