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目的 保留重组质粒pMDl8-T-ldh中变形链球菌ldh基因上下游同源区，用运动发酵单胞菌adhB基因置换胁基因构建重组质粒。方法 PCR法扩增adhB基因，克隆到PGEM-T载体，构建pGEMA重组质粒，以pMD18-T-1dh重组质粒为模板，反向PCR法缺失ldh，NcoI和XhoI酶产物片段和pGEMA质粒，连接得到重组质粒pMDLA。结果成功克隆adhB基因，并用该基因置换ldh基因构建重组质粒pMDLA。结论 本实验成功将反向PCR法引入缺失突变诱导，丰富了运动发酵单胞菌在医学领域的应用。