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目的 针对CCAAT增强子结合蛋白α(C/EBPα)启动子,建立能在糖皮质激素下促进间充质干细胞成骨分化的药物筛选体系.方法 采用PCR法从小鼠基因组中扩增C/EBPα启动子(-1381 bp/+ 45 bp)序列,连接pGL3-basic载体构建出pGL3-C/EBPα.利用脂质体将pGL3-C/EBPα与内参载体pRL-SV40共转染293T细胞建立筛药体系.利用地塞米松及氯化锂(LiCl)初步验证了筛药体系的有效性,并测试不同剂量淫羊藿苷、补骨脂素及丹参酮ⅡA在地塞米松作用下对C/EBPα启动子的抑制效应.通过ALP活性及茜素红染色检测这3种药物是否能挽救地塞米松抑制的成骨分化.结果 成功构建了基于C/EBPα启动子的药物筛选体系.初步检测发现通过测定荧光素酶活性能反映出地塞米松及LiCl对C/EBPα启动子的调控.淫羊藿苷呈浓度依赖性地抑制地塞米松对C/EBPα启动子的激活(P＜0.01或P＜0.05),丹参酮ⅡA在中、高剂量时才表现出抑制效应(P＜0.05),而补骨脂素未能抑制C/EBPα启动子的激活(P＞0.05).成骨分化实验发现,中、高剂量淫羊藿苷能有效挽救地塞米松抑制的成骨分化(P＜0.01),中、高剂量丹参酮ⅡA展示出部分缓解效应(P＜0.01),而补骨脂素在地塞米松作用下未能促进成骨细胞分化(P＞0.05).结论 经体外实验成功建立了一种激素型骨质疏松症药物筛选体系.