人Hath1-cDNA基因的克隆及其真核表达载体的构建

来源 :中国耳鼻咽喉颅底外科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lovesici
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目的克隆人Hath1-cDNA基因,构建其真核表达载体pIRES2-DsRed2-Hath1。方法从人的全血标本中提取DNA模板,经PCR获得Hath1-cDNA,将Hath1-cDNA和pIRES2-DsRed2质粒用限制性内切酶XhoⅠ、EcoRⅠ双酶切,酶切产物琼脂糖凝胶电泳,割胶纯化,前者回收1065 bp大小片断,后者回收大片断,再将回收的2个片断用T4 DNA连接酶连接,转化DH5α,挑选单克隆,提取质粒,所提质粒进行双酶切鉴定并测序。结果成功地从人全血中克隆出Hath1-cDNA,并构建了其
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