抗STARD7单克隆抗体的制备及鉴定

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目的制备抗STARD7(START domain containing 7,transcript variant 1)的单克隆抗体(monoclonal antibody,McAb),探讨STARD7蛋白在哺乳动物真核细胞中的表达,为进一步研究STARD7功能奠定基础。方法以纯化的原核表达STARD7蛋白免疫的BALB/c小鼠脾细胞与Sp2/0融合,通过间接ELISA的筛选和有限稀释克隆化,获得稳定分泌抗STARD7蛋白的McAb的杂交瘤细胞株。采用McAb通过Western blot方法对STARD7效价和特异性进行鉴定。结果获得2株能高效分泌特异性McAb的抗STARD7的杂交瘤细胞系W001、W003,其免疫球蛋白亚类均为IgG1。Western blot结果表明抗STARD7单克隆抗体能特异性识别真核细胞中的STARD7蛋白。结论成功获得抗STARD7的特异性的单克隆抗体,为进一步研究STARD7与肿瘤的相关功能研究创造了条件。
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