血管紧张素Ⅱ1型受体短发夹环RNA抑制其在哺乳动物细胞中的表达

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目的 探讨血管紧张素Ⅱ1型受体(AT1R)的短发夹环RNA质粒(pAT1R-shRNA)能否抑制AT1R在哺乳动物细胞中的表达.方法构建质粒并转染入鼠血管平滑肌细胞(VSMC)中,24 h后应用RT-PCR及Westem blot检测VSMC的AT1R的mRNA和蛋白表达变化.结果构建的质粒经测序鉴定验证与预期相符,转染细胞后RT-PCR吸光度值比值结果两质粒转染组分别为1.371±0.148和1.453±0.123,与对照组2.088±0.258比较差异有非常显著性(P<0.0D;Western blot结果两质粒转染组分别为1.121±0.037和1.2眈±0.068,与对照组3.168±0.210比较差异有非常显著性(P<0.01).提示两质粒均能明显降低AT1R的mRNA和蛋白表达.结论构建的pAT1R-shRNA具有RNA干扰作用,能在哺乳动物细胞中抑制该特异基因的表达。

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