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目的建立测定硝酸毛果芸香碱滴眼液含量的方法。方法应用分光光度线性组合分光光度法,不经分离直接测定硝酸毛果芸香碱、对羟基苯甲酸乙酯的含量,在208、210、256nm波长处分别测定吸收度,通过线性组合和单测分别计算两者的含量。结果硝酸毛果芸香碱在5~25μg·mL-1;对羟基苯甲酸乙酯在1~6μg·mL-1有良好的线性关系,平均回收率分别为99.45%（RSD=0.46%）、99.56%,（RSD=0.55%）。结论该方法简便、快速、准确、可用于该制剂的质量控制。