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[摘要]目的观察丹酚酸与氨氯地平联合使用对高血压合并高脂血症大鼠模型的心血管效应。方法取24只自发性高血压大鼠，高脂饲料饲喂2周后，造成高血压合并高脂血症大鼠模型，并根据血压、血脂、体重水平分成4组，即空白对照组、氨氯地平组、氨氯地平阿托伐他汀组和联合用药组，每组6只，连续给药4周，每周尾套法测血压，给药结束后测心脏血流动力学参数，取血浆测定BNP和NO、Ang_Ⅱ水平，并取心肌，测定组织中Ang_Ⅱ水平。结果与空白对照组比较，各药物干预组均能显著降低血压、HR和LVEDP以及血浆和心肌组织中Ang_Ⅱ水平（P<0.05，P<0.01），显著升高LVDP（P<0.01）；同时，氨氯地平阿托伐他汀组和联合用药组均能明显升高LVSP和+dp/dtmax（P<0.05，P<0.01），降低血浆BNP水平（P<0.05），且联合用药组能明显升高_dp/dtmax和NO水平（P<0.01）；另外，联合用药组的HR明显低于氨氯地平组和氨氯地平阿托伐他汀组（P<0.05，P<0.01），-dp/dtmax和NO水平均明显高于氨氯地平组（P<0.05）。结论丹酚酸联合氨氯地平对高血压合并高脂血症大鼠模型的心血管具有协同保护效应，其可能通过保护血管内皮功能，抑制RAAS系统激活实现。
[关键词]丹酚酸；氨氯地平；高血压；高脂血症；心血管；内皮功能
中图分类号：R544.1文献标识码：A文章编号：1009_816X（2014）05_0378_04
doi：10.3969/j.issn.1009_816x.2014.05.08Effects of Salvianolic Acid Combined with Amlodipine on Cardiovascular System in Rats with Hypertension Combined with Hyperlipidemia. CHEN An， MA Quan_xin， WANG Jun， et al. Shangyu Hospital of Chinese Traditional Medicine， Zhejiang 312300， China
[Abstract] Objective To study the effects of salvianolic acid combined with amlodipine on cardiovascular system in the model rats with hypertension combined with hyperlipidemia. Methods 24 spontaneously hypertensive rats （SHR） were fed on high fat diet for 2 weeks to establish a model of rats with hypertension and hyperlipidemia， and then they were divided into control group， amlodipine group， amlodipine & atorvastatin group and SA & amlodipine group， with 6 rats in each group. The rats were administrated with drugs for 4 weeks consecutively The blood pressure was measured every week and the cardiac hemodynamic parameters were measured after administration. The serum BNP， NO and Ang_Ⅱ levels and Ang_Ⅱ in myocardial tissues were detected. Results Compared with the control group， the blood pressure， heart rate， LVEDP and the level of Ang_Ⅱ in serum or myocardial tissues in the intervention group were significantly reduced （P<0.05， P<0.01）， while LVDP was significantly increased （P<0.01）. Meanwhile， the LVSP and +dp/dtmax in the amlodipine & atorvastatin group and SA & amlodipine group were significantly increased （P<0.05， P<0.01）， while BNP was significantly reduced （P<0.05）. And -dp/dtmax and NO level in the SA & amlodipine group were markedly increased （P<0.01）. Moreover， HR in the SA & amlodipine group was significantly lower than that of amlodipine group and amlodipine & atorvastatin group （P<0.05， P<0.01）， -dp/dtmax and NO level were significantly higher than that of amlodipine group （P<0.05）. Conclusions Salvianolic acid combined with amlodipine has a synergistic protective effect on cardiovascular system in hypertension and hyperlipidemia rats model， and it is possibly related to the effects of activating the protective endothelial function and inhibit the RAAS system. [Key words] Salvianolic acid； Amlodipine； Hypertension； Hyperlipidemia； Cardiovascular system； Endothelia function
据统计，我国35%～50%的高血压患者合并高胆固醇血症[1]。丹酚酸（Salvianolic acid，SA）为丹参中水溶性酚酸类化合物，研究表明，丹酚酸可降大鼠血脂、减轻ApoE小鼠糖尿病动脉粥样硬化和抵抗大鼠急性肝损伤[2，3]，可有效改善心肌供血、降低心肌梗死程度，能抑制细胞内外Ca2+通道，扩张血管和保护内皮，具有较强的抗氧化和抗炎能力[4]。本文采用丹酚酸和氨氯地平联合干预高血压合并高脂血症大鼠，观察并探讨其心血管保护效应及其作用机制，为中西医结合治疗高血压合并高脂血症疾病提供实验依据。
1资料与方法
1.1实验动物：SPF级自发性高血压大鼠（SHR）24只，雄性，体重350～400g，由北京维通利华实验动物技术有限公司提供[SCXK（京）2012_0001]；饲养于浙江中医药大学动物实验研究中心屏障环境中[SYXK（浙）2008_0115]，室温20～22℃，相对湿度为50%～70%，自由采食和饮水，12h/12h明暗交替。
1.2药物与试剂：丹酚酸浸膏粉（总酚酸含量93.5%，正大青春宝药业有限公司提供）；苯磺酸氨氯地平（北京塞科药业有限责任公司生产）；苯磺酸氨氯地平阿托伐他汀钙片（辉瑞制药有限公司生产）；一氧化氮（NO）试剂盒购自南京建成生物工程研究所；大鼠脑钠肽（brain natriuretic peptide， BNP）、血管紧张素_Ⅱ（Ang_Ⅱ）检测的ELISA试剂盒购自杭州达文生物有限公司。
1.3仪器：ALC_NIBP型无创尾动脉血压测定分析仪（上海奥尔科特生物科技有限公司）；MPA_CFS心功能分析系统（上海奥尔科特生物科技有限公司）；多功能酶标仪（Thermo Scientific公司）。
1.4方法：
1.4.1高血压合并高脂血症模型的建立及分组给药：参照衣桂燕等[5]的方法，选用SHR适应性饲养7天后予以饲喂高脂饲料（0.5%胆固醇、10%猪油、5%蛋黄粉和84.5%基础饲料），造模2周后尾静脉取血测定生化指标并测定血压，确定建立高血压合并高脂血症大鼠模型；并根据血压、血脂和体重水平分成4组，即联合用药组（丹酚酸浸膏粉100mg/kg+苯磺酸氨氯地平1mg/kg）、氨氯地平阿托伐他汀组（阿托伐他汀钙片2mg/kg+苯磺酸氨氯地平1mg/kg）、氨氯地平组（苯磺酸氨氯地平1mg/kg）和空白对照组（蒸馏水10ml/kg），每组6只。此后继续饲喂高脂饲料，同时各组大鼠每日经口灌胃相应药物，给药容量为10ml/kg，每日1次，连续给药4周。
1.4.2血压测定：给药期间，每周用ALC_NIBP型无创尾动脉血压测定分析仪测定大鼠尾动脉血压，选择血压和心率值相近的3次数据入选，取平均值为大鼠血压。
1.4.3大鼠心脏血流动力学的监测：连续给药4周后，各组大鼠用3%戊巴比妥钠溶液1.5ml/kg腹腔注射麻醉等常规处理后，将连有血压换能器的含有肝素钠的0.9%氯化钠注射液的聚乙烯管插入右颈动脉并直至左心室，稳定数分钟后，用MPA_CFS心功能分析系统记录和分析，观察心率（HR）、左室收缩压（LVSP）、舒张末期压（LVEDP）、左室发展压（LVDP）、左室最大上升/下降变化速率（±dp/dtmax）等指标。
1.4.4NO、BNP和Ang_Ⅱ含量的测定：动物处死前，打开腹腔，行腹主动脉穿刺取肝素抗凝血，3000rpm离心10min，分离血浆，测定血浆中NO、BNP和Ang_Ⅱ水平；处死后，立即取心脏，并取心尖部组织，用预冷的0.9%氯化钠注射液制备成10%的组织匀浆液，测定心肌组织中Ang_Ⅱ水平，所有测试方法均按试剂盒说明书进行。
1.5统计学处理：应用SPSS17.0版统计软件包建立数据库，并进行统计学分析。计量资料以（x-±s）表示，进行ANOVA单因素方差分析，并采用L_S_D检验进行两两比较，以P<0.05为差异有统计学意义。
2结果
2.1各组大鼠血压的变化：给药期间，空白对照组大鼠的血压曲线呈不断地上升趋势，氨氯地平阿托伐他汀组和氨氯地平组的血压曲线在给药1周时就出现下降，此后略有回升并维持一定的水平，波动性较大；而联合用药组血压曲线下降波动相对平稳；与空白对照组比较，氨氯地平阿托伐他汀组收缩压（SBP）从给药第1周起显著降低（P<0.05，P<0.01），氨氯地平组和联合用药组SBP均从给药第2周起降低显著（P<0.05，P<0.01），同时，各给药组大鼠的平均动脉压（MBP）和舒张压（DBP）均从给药第2周起降低显著（P<0.05，P<0.01）。另外，联合用药组MBP、SBP和DBP在给药第1周、第2周时的作用略弱于氨氯地平和氨氯地平阿托伐他汀组，但给药第3周和第4周时均优于氨氯地平组，并与氨氯地平阿托伐他汀组作用相当，但各给药组间血压比较差异无统计学意义（P>0.05）。见图1。图1各组大鼠血压的变化（x-±s，n=6）
注：与空白对照组比较*P<0.05，**P<0.01。A：平均动脉压；B：收缩压；C：舒张压。
2.2各组大鼠心脏血流动力学参数的变化：与空白对照组比较，各给药组的HR和LVEDP明显降低（P<0.05，P<0.01），LVDP明显升高（P<0.05，P<0.01）；同时，氨氯地平阿托伐他汀组和联合用药组的LVSP和+dp/dtmax均明显高于空白对照组（P<0.05，P<0.01），且联合用药组的-dp/dtmax亦明显高于空白对照组（P<0.01）；另外，联合用药组的HR明显低于氨氯地平组和氨氯地平阿托伐他汀组（P<0.05，P<0.01），同时-dp/dtmax明显高于氨氯地平组（P<0.05），其它指标各给药组间差异无统计学意义（P>0.05），见表1。表1各组大鼠心脏血流动力学的变化（x-±s，n=6） 指标空白对照组氨氯地平组氨氯地平阿托伐他汀组联合用药组HR（bpm）371.08±6.91352.73±6.743*349.92±6.66*342.68±4.13**△#LVSP（mmHg）127.48±5.60128.02±6.86137.12±4.54*136.13±9.34*LVEDP（mmHg）9.43±1.232.52±0.80**3.00±0.79**1.28±0.48**△△##LVDP（mmHg）120.07±3.63125.50±7.27*134.10±4.10**134.20±9.28**+dp/dtmax（mmHg/s）6692.28±293.737283.22±660.577417.15±531.07*8110.42±669.68**-dp/dtmax（mmHg/s）-5418.73±214.56-5734.37±315.82-5929.80±352.49-6282.52±481.58**△注：与空白对照组比较*P<0.05，**P<0.01；与氨氯地平组比较△P<0.05，△△P<0.01；与氨氯地平阿托伐他汀组比较#P<0.05，##P<0.012.3各组大鼠血浆NO、BNP、Ang_Ⅱ及心肌组织中Ang_Ⅱ水平的变化：与空白对照组比较，氨氯地平组的大鼠血浆和心肌组织中Ang_Ⅱ水平均明显低于空白对照组（P<0.01）；氨氯地平阿托伐他汀组的大鼠血浆BNP、血浆和心肌组织中Ang_Ⅱ水平亦显著低于空白对照组（P<0.05，P<0.01）；而联合用药组的大鼠血浆NO水平明显高于空白对照组（P<0.01），且血浆BNP以及血浆和心肌组织中Ang_Ⅱ水平均明显低于空白对照组（P<0.05，P<0.01）；同时，联合用药组的大鼠血浆NO水平亦显著高于氨氯地平组（P<0.05），其它指标各给药组间比较差异无统计学意义（P>0.05）；但联合用药组对NO的作用均优于氨氯地平组和氨氯地平阿托伐他汀组（P<0.05，P<0.01）；同时，对BNP、Ang_Ⅱ的作用均优于氨氯地平组（P<0.01），并与氨氯地平阿托伐他汀组的作用相当（P>0.05），见表2。表2各组大鼠血浆NO、BNP、Ang_Ⅱ和心肌组织中Ang_Ⅱ水平的变化（x-±s，n=6）
组别NO（μmol/L）BNP（ng/L）血浆Ang_Ⅱ（ng/L）心肌Ang_Ⅱ（ng/L）空白对照组12.95±0.47442.52±10.6279.25±1.5589.81±3.41氨氯地平组16.15±0.62438.04±13.0563.47±1.36**78.70±2.40**氨氯地平阿托伐他汀组16.55±0.42427.12±12.84*54.48±3.05**62.75±2.50**联合用药组17.23±0.61**△#423.97±11.44*△52.94±3.47**△△60.37±2.16**△△注：与空白对照组比较*P<0.05，**P<0.01；与氨氯地平组比较△P<0.05，△△P<0.01；与氨氯地平阿托伐他汀组比较#P<0.013讨论
本实验结果显示，丹酚酸联合氨氯地平治疗后，对高血压合并高脂血症大鼠的血压控制比单纯氨氯地平或氨氯地平阿托伐他汀复方制剂的稳定性明显提高，并在给药2周后其降压程度比单纯使用氨氯地平效果更佳，与氨氯地平阿托伐他汀复方制剂作用相当，表现出明显的协同作用，表明丹酚酸联合氨氯地平对高血压合并高脂血症大鼠的血压控制具有良好的调节作用。
近来研究发现，BNP升高可引起血压的急剧上升，BNP作为一种重要的神经内分泌因子，具有排钠排尿，对抗肾素-血管紧张素-醛固酮（RAAS）系统收缩血管的作用，其水平的高低可有效反映室壁的张力情况，并有临床资料显示心力衰竭患者中的BNP水平可以不同程度反映左室的重塑[6]。BNP与高血压的发生发展有着重要的关系，可反映疾病的发展程度，对预测抗血压治疗后的疗效具有指导意义。本实验结果显示，各药物干预后不仅具有显著降低心率、LVEDP和升高LVDP的作用，而且氨氯地平阿托伐他汀复方制剂和联合用药后大鼠的LVSP和+dp/dtmax均明显升高，且联合用药后能升高-dp/dtmax，表明联合用药对高血压合并高脂血症大鼠的异常血流动力学具有明显的改善作用；另外，结果还发现联合用药组大鼠的HR明显低于氨氯地平组和氨氯地平阿托伐他汀组，同时-dp/dtmax明显高于氨氯地平组，提示丹酚酸联合氨氯地平显著提高对心脏功能的保护效应。
Ang_Ⅱ可直接促使全身微动脉收缩，使血压升高，并且还可以通过降解缓激肽来减少NO的生成，又因促进氧化应激诱导自由基的产生而加速NO的灭活。已有资料证实，高血压患者血清NO水平较正常人低，可能是高血压时血管内皮细胞功能受损或失调，NO形成释放不足[7]。本实验结果显示，各药物干预组大鼠的血浆和心肌Ang_Ⅱ水平均有显著降低，氨氯地平阿托伐他汀组和丹酚酸联合氨氯地平组能显著降低BNP水平，然而仅有丹酚酸联合氨氯地平组大鼠血浆NO水平增高，且明显高于单独使用氨氯地平组，其机理可能是氨氯地平抑制血管紧张素转换酶（ACE）的活性，使得Ang_Ⅱ释放减少，减少ACE对缓激肽的代谢分解，缓激肽作用于血管内皮及其他靶细胞膜上缓激肽受体，激活细胞内NOS，而丹酚酸B又有促进NO形成的作用[8]，两者协同从而使得联合给药组血浆中NO水平明显高于其它药物干预组。
综上所述，丹酚酸联合氨氯地平对高血压合并高脂血症大鼠的心血管具有明显的保护作用，其通过保护血管内皮功能，抑制RAAS系统激活，从而有效地控制血压，改善血流动力学，逆转左室重构；与单用氨氯地平比较，联合用药具有协同效应和减少心血管事件发生的作用，这可能与丹酚酸具有多途径、多靶点的药理作用有关。
参考文献
[1]张？，冯如玉.他汀类药物的不良反应及防治对策[J].中国老年学杂志，2013，33（5）：1223-1225.
[2]赵桂峰，范英昌，郭茂娟.丹酚酸B对ApoE基因敲除糖尿病小鼠动脉粥样硬化的防治作用[J].中国老年学杂志，2013，33（4）：858-859.
[3]孔瑞，孙备，潘尚哈，等.缺血预处理联合丹酚酸B对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的保护作用[J].中华肝胆外科杂志，2010，16（12）：951-953.
[4]许波华，沈祥春，张良，等.丹酚酸B对血管内皮细胞迁移及管腔形成的影响[J].中国药理学通报，2012，28（4）：496-500.
[5]衣桂燕，杨庭树，李云芝，等.普罗布考与阿托伐他汀联合用药对高脂饮食自发性高血压大鼠血脂的影响[J].中国康复理论与实践，2008，14（10）：934-936.
[6]钟振洲.BNP对心力衰竭与左、右心力衰竭及心功能的评价作用分析[J].中国医药指南，2012，24（10）：96-97.
[7]夏猛，岳桂华.高血压与NO信号转导通路的关系及中医药影响概况[J].广西中医药，2013，26（3）：7-9.
[8]Cao wei， Guo xiaowen， Zheng huzhan， et al. Current Progress of Research on Pharmacologic Actions of Salvianolic Acid B[J]. Chin J Inte Med，2012，18（4）：316-320.
（收稿日期：2014_4_8）
[关键词]丹酚酸；氨氯地平；高血压；高脂血症；心血管；内皮功能
中图分类号：R544.1文献标识码：A文章编号：1009_816X（2014）05_0378_04
doi：10.3969/j.issn.1009_816x.2014.05.08Effects of Salvianolic Acid Combined with Amlodipine on Cardiovascular System in Rats with Hypertension Combined with Hyperlipidemia. CHEN An， MA Quan_xin， WANG Jun， et al. Shangyu Hospital of Chinese Traditional Medicine， Zhejiang 312300， China
[Abstract] Objective To study the effects of salvianolic acid combined with amlodipine on cardiovascular system in the model rats with hypertension combined with hyperlipidemia. Methods 24 spontaneously hypertensive rats （SHR） were fed on high fat diet for 2 weeks to establish a model of rats with hypertension and hyperlipidemia， and then they were divided into control group， amlodipine group， amlodipine & atorvastatin group and SA & amlodipine group， with 6 rats in each group. The rats were administrated with drugs for 4 weeks consecutively The blood pressure was measured every week and the cardiac hemodynamic parameters were measured after administration. The serum BNP， NO and Ang_Ⅱ levels and Ang_Ⅱ in myocardial tissues were detected. Results Compared with the control group， the blood pressure， heart rate， LVEDP and the level of Ang_Ⅱ in serum or myocardial tissues in the intervention group were significantly reduced （P<0.05， P<0.01）， while LVDP was significantly increased （P<0.01）. Meanwhile， the LVSP and +dp/dtmax in the amlodipine & atorvastatin group and SA & amlodipine group were significantly increased （P<0.05， P<0.01）， while BNP was significantly reduced （P<0.05）. And -dp/dtmax and NO level in the SA & amlodipine group were markedly increased （P<0.01）. Moreover， HR in the SA & amlodipine group was significantly lower than that of amlodipine group and amlodipine & atorvastatin group （P<0.05， P<0.01）， -dp/dtmax and NO level were significantly higher than that of amlodipine group （P<0.05）. Conclusions Salvianolic acid combined with amlodipine has a synergistic protective effect on cardiovascular system in hypertension and hyperlipidemia rats model， and it is possibly related to the effects of activating the protective endothelial function and inhibit the RAAS system. [Key words] Salvianolic acid； Amlodipine； Hypertension； Hyperlipidemia； Cardiovascular system； Endothelia function
据统计，我国35%～50%的高血压患者合并高胆固醇血症[1]。丹酚酸（Salvianolic acid，SA）为丹参中水溶性酚酸类化合物，研究表明，丹酚酸可降大鼠血脂、减轻ApoE小鼠糖尿病动脉粥样硬化和抵抗大鼠急性肝损伤[2，3]，可有效改善心肌供血、降低心肌梗死程度，能抑制细胞内外Ca2+通道，扩张血管和保护内皮，具有较强的抗氧化和抗炎能力[4]。本文采用丹酚酸和氨氯地平联合干预高血压合并高脂血症大鼠，观察并探讨其心血管保护效应及其作用机制，为中西医结合治疗高血压合并高脂血症疾病提供实验依据。
1资料与方法
1.1实验动物：SPF级自发性高血压大鼠（SHR）24只，雄性，体重350～400g，由北京维通利华实验动物技术有限公司提供[SCXK（京）2012_0001]；饲养于浙江中医药大学动物实验研究中心屏障环境中[SYXK（浙）2008_0115]，室温20～22℃，相对湿度为50%～70%，自由采食和饮水，12h/12h明暗交替。
1.2药物与试剂：丹酚酸浸膏粉（总酚酸含量93.5%，正大青春宝药业有限公司提供）；苯磺酸氨氯地平（北京塞科药业有限责任公司生产）；苯磺酸氨氯地平阿托伐他汀钙片（辉瑞制药有限公司生产）；一氧化氮（NO）试剂盒购自南京建成生物工程研究所；大鼠脑钠肽（brain natriuretic peptide， BNP）、血管紧张素_Ⅱ（Ang_Ⅱ）检测的ELISA试剂盒购自杭州达文生物有限公司。
1.3仪器：ALC_NIBP型无创尾动脉血压测定分析仪（上海奥尔科特生物科技有限公司）；MPA_CFS心功能分析系统（上海奥尔科特生物科技有限公司）；多功能酶标仪（Thermo Scientific公司）。
1.4方法：
1.4.1高血压合并高脂血症模型的建立及分组给药：参照衣桂燕等[5]的方法，选用SHR适应性饲养7天后予以饲喂高脂饲料（0.5%胆固醇、10%猪油、5%蛋黄粉和84.5%基础饲料），造模2周后尾静脉取血测定生化指标并测定血压，确定建立高血压合并高脂血症大鼠模型；并根据血压、血脂和体重水平分成4组，即联合用药组（丹酚酸浸膏粉100mg/kg+苯磺酸氨氯地平1mg/kg）、氨氯地平阿托伐他汀组（阿托伐他汀钙片2mg/kg+苯磺酸氨氯地平1mg/kg）、氨氯地平组（苯磺酸氨氯地平1mg/kg）和空白对照组（蒸馏水10ml/kg），每组6只。此后继续饲喂高脂饲料，同时各组大鼠每日经口灌胃相应药物，给药容量为10ml/kg，每日1次，连续给药4周。
1.4.2血压测定：给药期间，每周用ALC_NIBP型无创尾动脉血压测定分析仪测定大鼠尾动脉血压，选择血压和心率值相近的3次数据入选，取平均值为大鼠血压。
1.4.3大鼠心脏血流动力学的监测：连续给药4周后，各组大鼠用3%戊巴比妥钠溶液1.5ml/kg腹腔注射麻醉等常规处理后，将连有血压换能器的含有肝素钠的0.9%氯化钠注射液的聚乙烯管插入右颈动脉并直至左心室，稳定数分钟后，用MPA_CFS心功能分析系统记录和分析，观察心率（HR）、左室收缩压（LVSP）、舒张末期压（LVEDP）、左室发展压（LVDP）、左室最大上升/下降变化速率（±dp/dtmax）等指标。
1.4.4NO、BNP和Ang_Ⅱ含量的测定：动物处死前，打开腹腔，行腹主动脉穿刺取肝素抗凝血，3000rpm离心10min，分离血浆，测定血浆中NO、BNP和Ang_Ⅱ水平；处死后，立即取心脏，并取心尖部组织，用预冷的0.9%氯化钠注射液制备成10%的组织匀浆液，测定心肌组织中Ang_Ⅱ水平，所有测试方法均按试剂盒说明书进行。
1.5统计学处理：应用SPSS17.0版统计软件包建立数据库，并进行统计学分析。计量资料以（x-±s）表示，进行ANOVA单因素方差分析，并采用L_S_D检验进行两两比较，以P<0.05为差异有统计学意义。
2结果
2.1各组大鼠血压的变化：给药期间，空白对照组大鼠的血压曲线呈不断地上升趋势，氨氯地平阿托伐他汀组和氨氯地平组的血压曲线在给药1周时就出现下降，此后略有回升并维持一定的水平，波动性较大；而联合用药组血压曲线下降波动相对平稳；与空白对照组比较，氨氯地平阿托伐他汀组收缩压（SBP）从给药第1周起显著降低（P<0.05，P<0.01），氨氯地平组和联合用药组SBP均从给药第2周起降低显著（P<0.05，P<0.01），同时，各给药组大鼠的平均动脉压（MBP）和舒张压（DBP）均从给药第2周起降低显著（P<0.05，P<0.01）。另外，联合用药组MBP、SBP和DBP在给药第1周、第2周时的作用略弱于氨氯地平和氨氯地平阿托伐他汀组，但给药第3周和第4周时均优于氨氯地平组，并与氨氯地平阿托伐他汀组作用相当，但各给药组间血压比较差异无统计学意义（P>0.05）。见图1。图1各组大鼠血压的变化（x-±s，n=6）
注：与空白对照组比较*P<0.05，**P<0.01。A：平均动脉压；B：收缩压；C：舒张压。
2.2各组大鼠心脏血流动力学参数的变化：与空白对照组比较，各给药组的HR和LVEDP明显降低（P<0.05，P<0.01），LVDP明显升高（P<0.05，P<0.01）；同时，氨氯地平阿托伐他汀组和联合用药组的LVSP和+dp/dtmax均明显高于空白对照组（P<0.05，P<0.01），且联合用药组的-dp/dtmax亦明显高于空白对照组（P<0.01）；另外，联合用药组的HR明显低于氨氯地平组和氨氯地平阿托伐他汀组（P<0.05，P<0.01），同时-dp/dtmax明显高于氨氯地平组（P<0.05），其它指标各给药组间差异无统计学意义（P>0.05），见表1。表1各组大鼠心脏血流动力学的变化（x-±s，n=6） 指标空白对照组氨氯地平组氨氯地平阿托伐他汀组联合用药组HR（bpm）371.08±6.91352.73±6.743*349.92±6.66*342.68±4.13**△#LVSP（mmHg）127.48±5.60128.02±6.86137.12±4.54*136.13±9.34*LVEDP（mmHg）9.43±1.232.52±0.80**3.00±0.79**1.28±0.48**△△##LVDP（mmHg）120.07±3.63125.50±7.27*134.10±4.10**134.20±9.28**+dp/dtmax（mmHg/s）6692.28±293.737283.22±660.577417.15±531.07*8110.42±669.68**-dp/dtmax（mmHg/s）-5418.73±214.56-5734.37±315.82-5929.80±352.49-6282.52±481.58**△注：与空白对照组比较*P<0.05，**P<0.01；与氨氯地平组比较△P<0.05，△△P<0.01；与氨氯地平阿托伐他汀组比较#P<0.05，##P<0.012.3各组大鼠血浆NO、BNP、Ang_Ⅱ及心肌组织中Ang_Ⅱ水平的变化：与空白对照组比较，氨氯地平组的大鼠血浆和心肌组织中Ang_Ⅱ水平均明显低于空白对照组（P<0.01）；氨氯地平阿托伐他汀组的大鼠血浆BNP、血浆和心肌组织中Ang_Ⅱ水平亦显著低于空白对照组（P<0.05，P<0.01）；而联合用药组的大鼠血浆NO水平明显高于空白对照组（P<0.01），且血浆BNP以及血浆和心肌组织中Ang_Ⅱ水平均明显低于空白对照组（P<0.05，P<0.01）；同时，联合用药组的大鼠血浆NO水平亦显著高于氨氯地平组（P<0.05），其它指标各给药组间比较差异无统计学意义（P>0.05）；但联合用药组对NO的作用均优于氨氯地平组和氨氯地平阿托伐他汀组（P<0.05，P<0.01）；同时，对BNP、Ang_Ⅱ的作用均优于氨氯地平组（P<0.01），并与氨氯地平阿托伐他汀组的作用相当（P>0.05），见表2。表2各组大鼠血浆NO、BNP、Ang_Ⅱ和心肌组织中Ang_Ⅱ水平的变化（x-±s，n=6）
组别NO（μmol/L）BNP（ng/L）血浆Ang_Ⅱ（ng/L）心肌Ang_Ⅱ（ng/L）空白对照组12.95±0.47442.52±10.6279.25±1.5589.81±3.41氨氯地平组16.15±0.62438.04±13.0563.47±1.36**78.70±2.40**氨氯地平阿托伐他汀组16.55±0.42427.12±12.84*54.48±3.05**62.75±2.50**联合用药组17.23±0.61**△#423.97±11.44*△52.94±3.47**△△60.37±2.16**△△注：与空白对照组比较*P<0.05，**P<0.01；与氨氯地平组比较△P<0.05，△△P<0.01；与氨氯地平阿托伐他汀组比较#P<0.013讨论
本实验结果显示，丹酚酸联合氨氯地平治疗后，对高血压合并高脂血症大鼠的血压控制比单纯氨氯地平或氨氯地平阿托伐他汀复方制剂的稳定性明显提高，并在给药2周后其降压程度比单纯使用氨氯地平效果更佳，与氨氯地平阿托伐他汀复方制剂作用相当，表现出明显的协同作用，表明丹酚酸联合氨氯地平对高血压合并高脂血症大鼠的血压控制具有良好的调节作用。
近来研究发现，BNP升高可引起血压的急剧上升，BNP作为一种重要的神经内分泌因子，具有排钠排尿，对抗肾素-血管紧张素-醛固酮（RAAS）系统收缩血管的作用，其水平的高低可有效反映室壁的张力情况，并有临床资料显示心力衰竭患者中的BNP水平可以不同程度反映左室的重塑[6]。BNP与高血压的发生发展有着重要的关系，可反映疾病的发展程度，对预测抗血压治疗后的疗效具有指导意义。本实验结果显示，各药物干预后不仅具有显著降低心率、LVEDP和升高LVDP的作用，而且氨氯地平阿托伐他汀复方制剂和联合用药后大鼠的LVSP和+dp/dtmax均明显升高，且联合用药后能升高-dp/dtmax，表明联合用药对高血压合并高脂血症大鼠的异常血流动力学具有明显的改善作用；另外，结果还发现联合用药组大鼠的HR明显低于氨氯地平组和氨氯地平阿托伐他汀组，同时-dp/dtmax明显高于氨氯地平组，提示丹酚酸联合氨氯地平显著提高对心脏功能的保护效应。
Ang_Ⅱ可直接促使全身微动脉收缩，使血压升高，并且还可以通过降解缓激肽来减少NO的生成，又因促进氧化应激诱导自由基的产生而加速NO的灭活。已有资料证实，高血压患者血清NO水平较正常人低，可能是高血压时血管内皮细胞功能受损或失调，NO形成释放不足[7]。本实验结果显示，各药物干预组大鼠的血浆和心肌Ang_Ⅱ水平均有显著降低，氨氯地平阿托伐他汀组和丹酚酸联合氨氯地平组能显著降低BNP水平，然而仅有丹酚酸联合氨氯地平组大鼠血浆NO水平增高，且明显高于单独使用氨氯地平组，其机理可能是氨氯地平抑制血管紧张素转换酶（ACE）的活性，使得Ang_Ⅱ释放减少，减少ACE对缓激肽的代谢分解，缓激肽作用于血管内皮及其他靶细胞膜上缓激肽受体，激活细胞内NOS，而丹酚酸B又有促进NO形成的作用[8]，两者协同从而使得联合给药组血浆中NO水平明显高于其它药物干预组。
综上所述，丹酚酸联合氨氯地平对高血压合并高脂血症大鼠的心血管具有明显的保护作用，其通过保护血管内皮功能，抑制RAAS系统激活，从而有效地控制血压，改善血流动力学，逆转左室重构；与单用氨氯地平比较，联合用药具有协同效应和减少心血管事件发生的作用，这可能与丹酚酸具有多途径、多靶点的药理作用有关。
参考文献
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（收稿日期：2014_4_8）