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悬浮培养Sf21细胞高效表达牛γ-干扰素及其特性鉴定

来源 :中国畜牧兽医 | 被引量 : 0次 | 上传用户：xiaofeixiaheiwa
【摘 要】
：
本试验旨在研究重组牛γ-干扰素（rBovIFN-γ）在Sf21细胞中高效表达及其特性鉴定。利用逆转录—聚合酶链式反应（RT-PCR）技术从奶牛外周血淋巴细胞的总RNA中扩增出不含信号肽的BovI
【作 者】
：
王海春 贾红 袁维峰 侯绍华 郭晓宇 鑫婷 朱鸿飞 
【机 构】
：
中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
【出 处】
：
中国畜牧兽医
【发表日期】
：
2012年11期
【关键词】
：
牛γ-干扰素 杆状病毒 悬浮培养 质谱分析 抗病毒活性 bovine interferon-γ  baculovirus  suspension culture 
【基金项目】
：
公益性行业（农业）科研专项经费项目（200903027）, 863计划（SQ2011AAJY2746,2012AA101302）, 中央级公益性科研院所基本科研业务费（2010js-1,2011js-3）, “十一五”国家科技支撑计划重点项目（2010BAD04B02）, 2011年及2012年农业部动物疫情监测与防治项目
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本试验旨在研究重组牛γ-干扰素（rBovIFN-γ）在Sf21细胞中高效表达及其特性鉴定。利用逆转录—聚合酶链式反应（RT-PCR）技术从奶牛外周血淋巴细胞的总RNA中扩增出不含信号肽的BovIFN-γ基因片段。将其克隆到pFast-BacTMHTA中构建重组质粒pFastBacTMHTA-BovIFN-γ。然后将重组质粒转化至DH10Bac感受态细胞获得重组穿梭质粒rBacmid-BovIFN-γ。转染Sf21昆虫细胞后获得重组杆状病毒rBac-BovIFN-γ,应用Sf21细胞悬浮培养技术大量表达rB
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