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目的 探讨5-氟尿嘧啶(5-FU)对肝癌细胞系BEL-7402细胞的作用，并对免于5-FU杀伤的存活细胞进行干细胞表面标志物的检测和“肝癌干细胞”的细胞生物学鉴定。方法 检测5-FU作用前后BEL-7402细胞增殖能力、细胞周期和细胞表面标志物CD56、CD54、上皮细胞黏附分子(EpCAM)和CD133表达率的变化；通过集落形成实验检测CD56、CD54、EpCAM、CD133阳性细胞和阴性细胞的克隆形成能力并对其进行比较。两组间均数比较采用t检验，两组数据间构成比比较采用x 2检验。 结果 5-FU对BEL-7402细胞的增殖抑制作用呈时间和剂量依赖性。10 μ g/ml5-FU作用48 h后，Go/G1期细胞比例由对照组的57.50％±0.98％升高至实验组的68.70％±3.41％(P＜0.05); S期细胞比例由对照组的40.26％±4.12％下降至实验组的31.80％±4.15％（P＜ 0.01）;实验组G2/M期细胞消失，对照组该期细胞比例为5.80％±1.87％（P＜0.01）。细胞周期分布变化明显，差异具有统计学意义。5-FU处理使BEL-7402细胞中CD56、CD54、EpCAM和CD133阳性细胞比例分别由0.57％±0.12％，8.10％±6.79％，0.3％±0.01％，3.20％±0.99％升高至4.13％±0.06％，50.08％±1.69％,0.55％±0.07％,10.51％±1.13％，差异具有统计学意义（P＜ 0.05）。软琼脂集落形成实验中，CD56、CD54、EpCAM、CD133阴性细胞与阳性细胞的成集落比例分别为2.11％±0.21％,3.32％±0.31％; 0.86％±0.101％，2.40±0.52％;7.19％±0.56％,7.73±0.71％; 2.70％±0.26％，5.75％±0.81％。各组阳性细胞集落形成率与阴性细胞比较，均有明显增加，差异具有统计学意义（P＜0.05）。结论 一定剂量的5-FU能够富集肝癌细胞系BEL-7402中的肿瘤干细胞;同EpCAM和CD133一样，CD56和CD54单阳性细胞比其各自单阴性细胞具有更强的克隆形成能力，这提示CD56和CD54可能成为肝癌干细胞的分子标志物。