【摘 要】
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以高产虾青素的雨生红球藻(Haematococcus pluvialis Flotow)FACHB-712藻株为材料,研究2种细胞形态(营养细胞和厚壁孢子)在低温保藏下的复苏率及其差异原因。结果显示,采用两
【基金项目】
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国家开发投资公司资助项目(Y341151Z09);国家高技术研究发展计划(863计划)项目(2014AA022001)~~
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以高产虾青素的雨生红球藻(Haematococcus pluvialis Flotow)FACHB-712藻株为材料,研究2种细胞形态(营养细胞和厚壁孢子)在低温保藏下的复苏率及其差异原因。结果显示,采用两步法(先预冻降温后再投入液氮中)冻存其营养细胞,在不同冻存条件下,其存活率均低于5%,以10%甘油作为保护剂、冻存速率为0.5℃/min、预冻温度为-40℃、保留30 min,然后再投入液氮罐(-196℃)中保藏,其存活率可达到13.3%。采用两步法冻存厚壁孢子,其复苏存活率高达66.13%,复苏萌发后细胞的生长特性、虾青素含量与液氮保藏前无明显差异(P>0.05)。对液氮保藏前后藻细胞形态和超微结构观察结果表明,超低温保藏后,营养细胞的结构受到较大损伤,而厚壁孢子受到的损伤相对较小。当添加不同保护剂后,直接将厚壁孢子分别冻存在-20℃、-80℃低温及液氮中,发现-80℃低温冻存处理组的复苏存活率相对较高,可达27%。研究表明采用两步法先预冻降温后再投入液氮中冻存厚壁孢子,是长期保藏雨生红球藻FACHB-712的最佳方法,也可采用一步法将厚壁孢子冻存于-80℃冰箱中。
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