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【摘要】 目的 临床分析肺结核早期诊断中γ干扰素释放试验的应用价值。方法 选取我院2011年10月至2012年10月收治的160例肺结核患者作为研究组，选取同期50例健康体检者作为对照组，给予γ干扰素释放试验、结核细菌素皮试。结果 经过检验后得知，研究组治疗前的γ试验阳性率914%，细菌素皮试阳性率462%，两者对比存在统计学差异（P<005）。对照组治疗前的γ试验阳性率71%，细菌素皮试阳性率167%，两者对比存在统计学差异（P<005），研究组与对照组对比具有明显统计学差异（P<005）。γ干扰素释放试验在肺结核早期诊断敏感性为914%、阳性预测值为966%、阴性预测值为738%、特异性为923%，细菌素皮试分别为462%、914%、303%、721%，研究组治疗前后的γ干扰素释放试验阳性率为914%、258%，两者对比具有明显统计学差异（P<005）。结论 针对肺结核早期诊断，采用γ干扰素释放试验，具有特异性高、敏感性高等优点，值得临床推广应用。
【关键词】 γ干扰素释放试验；细菌素皮试；肺结核；早期诊断
doi：103969/jissn1004-7484（s）201306254 文章编号：1004-7484（2013）-06-3017-02
针对结核病，给予早期、准确、快速的诊断，是治疗与预防的关键。目前，对于肺结核的早期诊断，通常采取结核菌素试验、痰抗酸杆菌试验，然而前者特异性较差，后者阳性率较低[1]。笔者选取我院2011年10月至2012年10月收治的160例肺结核患者作为研究组，给予γ干扰素释放试验，探讨其诊断价值，现总结如下：
1 资料与方法
11 一般资料 选取我院2011年10月至2012年10月收治的160例肺结核患者作为研究组，女性100例，女性60例，年龄19-88岁，平均年龄547±106岁，选取同期50例健康体检者作为对照组，男性29例，女性21例，年龄17-85岁，平均年龄538±105岁。
12 方法 受试验对象均给予治疗前抽血，抽血量未4ml，再给予γ干扰素释放试验、细菌素皮试。研究组在常规抗核治疗后3-7月，给予一次γ干扰素释放试验[2]。
γ干扰素释放试验：选择默克雪兰诺有限公司提供的TSPOTTB试剂盒，根据试剂说明书、SOP文件严格操作，抽取外周静脉4ml血，注入至肝素锂抗凝管，混匀后分离单个核细胞。接着选择AIM培养液将其调至250万单个核细胞，加入至试剂盒内，每例标本需四个微孔板，加入至抗原B、抗原A、阳性对照与AIM，接着在5%的CO2培养箱内进行17-21h孵育，第2d时将微孔板取出，洗脱PBS，加入抗γ干扰素，在温度为4摄氏度孵育2h，洗脱PBS，待显色后晒干。选择放大镜手工记录每孔中的斑点数。结果判断：对照斑点数小于6则为阴性，抗原A、B减去对照斑点数大于6，则为阳性。阴性对照数大于6、孔斑点数大于2倍的阴性对照数，则为阳性[3]。
细菌素皮试：选择结合细菌蛋白衍生物作为试剂，受试对象在1/3的左前臂背侧，给予01ml的皮内注射，72h后判断结果：硬结小于5mm：（-），硬结5-9mm：（+），硬结10-15mm；（++），硬结15-19mm（+++），硬结大于20mm：（++++）；（+++）、（++++）属于阳性[4]。
13 统计学分析 本次研究患者的临床资料与数据全部采用SPSS180统计学软件进行处理分析，计量资料采用t检验，治疗前后采用X2检验，P<005为差异有明显性，有统计学意义。
2 结 果
经过检验后得知，研究组治疗前的γ试验阳性率914%，细菌素皮试阳性率462%，两者对比存在统计学差异（P<005）。对照组治疗前的γ试验阳性率71%，细菌素皮试阳性率167%，两者对比存在统计学差异（P<005），研究组与对照组对比具有明显统计学差异（P<005）。γ干扰素释放试验在肺结核早期诊断敏感性为914%、阳性预测值为966%、阴性预测值为738%、特异性为923%，细菌素皮试分别为462%、914%、303%、721%，研究组治疗前后的γ干扰素释放试验阳性率为914%、258%，两者对比具有明显统计学差异（P<005）。
3 讨 论
结核病是因感染结核杆菌而引发的一种慢性传染病，主要通过呼吸道或消化道传染。全身各个脏器几乎都能引起结核感染，但以肺部感染最为多见。在临床上，对于肺结核的诊断，血清结核抗体定性检测：敏感性在0-100%，特异性约为47-100%；结核菌素试验（TST）：受卡介苗干扰，特异性差，在肺结核病人中存在10-25%的假阴性，会因非结杆菌的感染而造成假阳性结果。
而γ干扰素释放试验技术则明显具有高特异性、高敏感性的特点，机体感染结核杆菌以后，存于血液中的特异性淋巴细胞会在再次接触结核杆菌特异性抗原时，产生和分泌相应的细胞因子干扰素。通过对该细胞因子的定量检测，可以对疾病的感染状况进行判断。根据这个原理，选取存在于结核杆菌，但在卡介苗和大多數非结核杆菌中普遍缺失的RD1区编码的ESAT-6和CFP-10作为结核杆菌特异性抗原，与新鲜采取的肝素钠抗凝全血或者PBMC（外周血单个核细胞）充分混合孵育后，应用酶联免疫法或者免疫斑点法检测特异性γ-干扰素的释放[5]，判断机体被结核杆菌感染的风险。
在本组实验中，研究组治疗前后的γ干扰素释放试验阳性率为914%、258%，两者对比具有明显统计学差异（P<005）。这说明，针对肺结核早期诊断，采用γ干扰素释放试验，具有特异性高、敏感性高等优点，值得临床推广应用。
参考文献
[1] 黎燕琼，谭守勇，谭耀驹，等肺结核的体外干扰素-γ检测与PPD试验相关性[J]实用医学杂志，2009，25（15）：2568-2569
[2] 刘佳庆，张立，孙海柏，等γ干扰素释放试验在肺结核早期诊断中的应用[J]山东医药，2013，53（3）：82-84
[3] 张少俊，肖和平复治肺结核与初治结核病患者外周血T细胞亚群等的变化及其意义[J]中华结核和呼吸杂志，2011，34（12）：884-887
[4] 刘一，张波，王安生，等外周血单核细胞γ干扰素分泌反应在免疫抑制患者肺结核诊断中的应用[J]实用医学杂志，2009，25（2）：207-209
[5] 郭淑湘，马冬梅肺结核患者血清骨桥蛋白和白介素18的检测及意义[J]中国全科医学，2012，15（31）：3617-3619
【关键词】 γ干扰素释放试验；细菌素皮试；肺结核；早期诊断
doi：103969/jissn1004-7484（s）201306254 文章编号：1004-7484（2013）-06-3017-02
针对结核病，给予早期、准确、快速的诊断，是治疗与预防的关键。目前，对于肺结核的早期诊断，通常采取结核菌素试验、痰抗酸杆菌试验，然而前者特异性较差，后者阳性率较低[1]。笔者选取我院2011年10月至2012年10月收治的160例肺结核患者作为研究组，给予γ干扰素释放试验，探讨其诊断价值，现总结如下：
1 资料与方法
11 一般资料 选取我院2011年10月至2012年10月收治的160例肺结核患者作为研究组，女性100例，女性60例，年龄19-88岁，平均年龄547±106岁，选取同期50例健康体检者作为对照组，男性29例，女性21例，年龄17-85岁，平均年龄538±105岁。
12 方法 受试验对象均给予治疗前抽血，抽血量未4ml，再给予γ干扰素释放试验、细菌素皮试。研究组在常规抗核治疗后3-7月，给予一次γ干扰素释放试验[2]。
γ干扰素释放试验：选择默克雪兰诺有限公司提供的TSPOTTB试剂盒，根据试剂说明书、SOP文件严格操作，抽取外周静脉4ml血，注入至肝素锂抗凝管，混匀后分离单个核细胞。接着选择AIM培养液将其调至250万单个核细胞，加入至试剂盒内，每例标本需四个微孔板，加入至抗原B、抗原A、阳性对照与AIM，接着在5%的CO2培养箱内进行17-21h孵育，第2d时将微孔板取出，洗脱PBS，加入抗γ干扰素，在温度为4摄氏度孵育2h，洗脱PBS，待显色后晒干。选择放大镜手工记录每孔中的斑点数。结果判断：对照斑点数小于6则为阴性，抗原A、B减去对照斑点数大于6，则为阳性。阴性对照数大于6、孔斑点数大于2倍的阴性对照数，则为阳性[3]。
细菌素皮试：选择结合细菌蛋白衍生物作为试剂，受试对象在1/3的左前臂背侧，给予01ml的皮内注射，72h后判断结果：硬结小于5mm：（-），硬结5-9mm：（+），硬结10-15mm；（++），硬结15-19mm（+++），硬结大于20mm：（++++）；（+++）、（++++）属于阳性[4]。
13 统计学分析 本次研究患者的临床资料与数据全部采用SPSS180统计学软件进行处理分析，计量资料采用t检验，治疗前后采用X2检验，P<005为差异有明显性，有统计学意义。
2 结 果
经过检验后得知，研究组治疗前的γ试验阳性率914%，细菌素皮试阳性率462%，两者对比存在统计学差异（P<005）。对照组治疗前的γ试验阳性率71%，细菌素皮试阳性率167%，两者对比存在统计学差异（P<005），研究组与对照组对比具有明显统计学差异（P<005）。γ干扰素释放试验在肺结核早期诊断敏感性为914%、阳性预测值为966%、阴性预测值为738%、特异性为923%，细菌素皮试分别为462%、914%、303%、721%，研究组治疗前后的γ干扰素释放试验阳性率为914%、258%，两者对比具有明显统计学差异（P<005）。
3 讨 论
结核病是因感染结核杆菌而引发的一种慢性传染病，主要通过呼吸道或消化道传染。全身各个脏器几乎都能引起结核感染，但以肺部感染最为多见。在临床上，对于肺结核的诊断，血清结核抗体定性检测：敏感性在0-100%，特异性约为47-100%；结核菌素试验（TST）：受卡介苗干扰，特异性差，在肺结核病人中存在10-25%的假阴性，会因非结杆菌的感染而造成假阳性结果。
而γ干扰素释放试验技术则明显具有高特异性、高敏感性的特点，机体感染结核杆菌以后，存于血液中的特异性淋巴细胞会在再次接触结核杆菌特异性抗原时，产生和分泌相应的细胞因子干扰素。通过对该细胞因子的定量检测，可以对疾病的感染状况进行判断。根据这个原理，选取存在于结核杆菌，但在卡介苗和大多數非结核杆菌中普遍缺失的RD1区编码的ESAT-6和CFP-10作为结核杆菌特异性抗原，与新鲜采取的肝素钠抗凝全血或者PBMC（外周血单个核细胞）充分混合孵育后，应用酶联免疫法或者免疫斑点法检测特异性γ-干扰素的释放[5]，判断机体被结核杆菌感染的风险。
在本组实验中，研究组治疗前后的γ干扰素释放试验阳性率为914%、258%，两者对比具有明显统计学差异（P<005）。这说明，针对肺结核早期诊断，采用γ干扰素释放试验，具有特异性高、敏感性高等优点，值得临床推广应用。
参考文献
[1] 黎燕琼，谭守勇，谭耀驹，等肺结核的体外干扰素-γ检测与PPD试验相关性[J]实用医学杂志，2009，25（15）：2568-2569
[2] 刘佳庆，张立，孙海柏，等γ干扰素释放试验在肺结核早期诊断中的应用[J]山东医药，2013，53（3）：82-84
[3] 张少俊，肖和平复治肺结核与初治结核病患者外周血T细胞亚群等的变化及其意义[J]中华结核和呼吸杂志，2011，34（12）：884-887
[4] 刘一，张波，王安生，等外周血单核细胞γ干扰素分泌反应在免疫抑制患者肺结核诊断中的应用[J]实用医学杂志，2009，25（2）：207-209
[5] 郭淑湘，马冬梅肺结核患者血清骨桥蛋白和白介素18的检测及意义[J]中国全科医学，2012，15（31）：3617-3619