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【摘要】 目的：探讨激肽原基因KNG1(-1742T>C，Ile581Thr)多态性与血浆高分子量激肽原水平、下肢深静脉血栓形成的关系。方法：采用聚合酶链反应(PCR)扩增目的基因，采用限制性片段长度多态性(RFLP)区分KNG1(-1742T>C，Ile581Thr)基因多态性，并经测序分析证实；应用SPSS 13.0軟件分析数据。结果：(1)两组研究对象之间APTT、HK差异有统计学意义 (P<0.05)，LEDVT组HK高于对照组，APTT低于对照组。(2)两基因型频率分布均符合Hardy-Weinberg遗传平衡(P>0.05)。(3)KNG1(-1742T>C，Ile581Thr)基因型频率、等位基因频率在两组间分布不同 (P<0.05)。结论：(1)血HK浓度升高可能是LEDVT的独立危险因素。(2)KNG1(-1742T>C，Ile581Thr)基因与APTT有关。(3)KNG1(-1742T>C，Ile581Thr)基因多态性与血浆HK浓度有关，-1742CC+TC基因型携带者血浆HK浓度高，C-1742等位基因与血浆HK浓度升高相关。(4)KNG1(-1742T>C，Ile581Thr)基因多态性与LEDVT有关。
【关键词】 下肢深静脉血栓形成； KNG1； 基因多态性
The Relationship between KNG1(-1742T>C，Ile581Thr)Polymorphisms and Plasma High Molecular Weight Kininogen，Lowerextremity Deep Venous Thrombosis/GAO Chao，CHEN Qun.//Medical Innovation of China，2012，9(17):001-003
【Abstract】 Objective：To investigate the relationship between KNG1(-1742T>C，Ile581Thr)polymorphisms and plasma high molecular weight kininogen，Lowerextremity Deep Venous Thrombosis. Methods：Polymerase chain reaction(PCR)and Restriction fragment length polymorphism (RFLP)were used to characterize KNG1(-1742T>C，Ile581Thr) genotypes.All of the genotypes were checked by DNA sequencing.SSPS 13.0 was used to analyze all the data.Results：(1)The levels of partial thromboplastin time(APTT)，Plasma high molecular weight kininogen (HK)had significant differences between two groups(P<0.05)，HK were higher in case group，APTT was lower in case group.(2)The distributions of KNG1(-1742T>C，Ile581Thr)genotypes between case group and control group were under the assumption of the Hardy-Weinberg equilibrium (P>0.05).(3)KNG1(1742T>C，Ile581Thr) genotypes and alleles had significant differences between two groups (P<0.05).Conclusion：(1)Increase of Fg and HK is an independent risk factor for LEDVT.(2)KNG1(-1742T>C，Ile581Thr)genotypes were associated with APTT.(3)KNG1(-1742T>C，Ile581Thr )genotypes were associated with the plasma high-molecular-weight kininogen.Subjects carrying -1742CC+TC genotypes tend to be more susceptible to higher HK concentration，and the T-1742 allele was associated with the plasma high molecular weight kininogen.(4)KNG1 (-1742T>C，Ile581Thr) genotypes were associated with LEDVT respectively.
【Key words】 Lowerextremity deep venous thrombosis； KNG1； Gene polyrnorphism
First-author’s address: Provincial Clinical Medical College of Fujian Medical University， Fuzhou 350001，China
doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2012.17.001
KNG1基因定位于第3号染色体包表达高分子量激肽原(HK)和低分子量激肽原(LK)。HK是120 kDa 的单链糖蛋白，主要作用是接触性激活[1]。HK 分为6 个结构域，6 区具有激肽释放酶原和凝血因子结合的位点，激肽释放酶使HK 在Lys362~Arg363 和Arg371~Ser372 之间裂解[2]，释放出缓激肽，同时产生两条链的活化型高分子激肽原( HKa)。 HKa 包含一个62 kDa的重链和一个56 kDa的轻链，并通过1 区Cys10和6 区Cys604之间形成的二硫键相连接[3]。 从HK 转变成HKa 的过程，伴随着显著的结构重排，HKa 以重新组成的结构域为特征，并且增加了第5 区的暴露面[4]，从而可以诱导增生的内皮细胞凋亡，抑制血管再生。高分子量激肽原第5结构域也可以阻碍黑素瘤细胞的新陈代谢，抑制血小板的粘附聚集，调节血小板与白细胞的相互作用。 1 资料与方法
1.1 一般资料 病例组(LEDVT组)：2011年1- 12月在福建省立医院住院的下肢深静脉血栓形成(LEDVT)患者共143例。纳入标准为：根据中国中西医结合学会周围血管疾病专业委员会制定的下肢深静脉血栓形成诊断标准进行诊断[5]，并全部经过下肢深静脉造影确诊。对照组：同期在福建省立医院门诊体检及住院的患者中无LEDVT病史者150例。两组研究对象均来自于福建本地的汉族人群，无血缘关系，非近期结婚。
1.2 所有研究对象排除标准如下：(1)手术、创伤史、严重感染；(2)急性心梗、急性心衰、急性脑血管意外者；(3)心脑血管其他部位血栓，既往血栓病史；(4)恶性肿瘤、严重肝肾疾病、尿毒症、糖尿病者；(5) DIC、近期内服用激素、免疫抑制剂、抗凝药、抗血小板药。
1.3 方法 (1)采血：所有研究对象均常规禁食8 h后，于次日清晨6点至8点抽取肘静脉血4 ml， 2 ml以乙二胺四乙酸(Ethylenediamine tetraacetic acid，EDTA)抗凝管收集，用于提取基因组DNA； 2 ml以枸橼酸钠抗凝管收集，用于测定血浆高分子量激肽原浓度。(2)血浆高分子量激肽原浓度测定：人的高分子量激肽原(HMWK)酶联免疫吸附测定试剂盒测定。(3)细胞基因组DNA提取试剂盒：购自北京天根生化科技有限公司。(4)PCR反应：2× MasterMix 12.5 μl、上游引物10uM 1 μl、下游引物10uM 1 μl、cDNA 2 μl 加DEPC水 8.5 μl组成25 μl体系。(5)引物：委托大连宝生物工程有限公司合成。(6)PCR产物酶切：PCR产物 10 μl、10×FastDigest buffer 2.0 μl、DraIII內切酶 1.0 μl加去离子水17 μl组成20 μl体系。
1.4 统计学处理 所有数据均用SPSS 13.0软件进行分析。计量资料以(x±s)表示，两组均数差异比较先行方差齐性检验(Levene Statistic)，方差齐采用t检验，方差不齐采用t’检验。研究对象与Hardy-Weinberg遗传平衡的符合程度采用四格表 字2检验。基因型频率构成比采用秩和检验。
2 结果
2.1 两组临床资料比较 两组活化部分凝血活酶时间(APTT)、高分子量激肽原(HK)比较差异均有统计学意义(P<0.05)，LEDVT组的HK浓度高于对照组，APTT低于对照组。见表1、表2。
表1 两组临床资料比较
组别 APTT HK
病例组(n=143) 33.5±7.5 7.86±2.31
对照组(n=150) 37.6±8.9 7.20±1.89
P值 0.036 0.003
表2 两组在 KNG1不同基因型间APTT、血浆HK的比较
组别 1742CC+TC型 1742TT型 P值
病例组(n=143) APTT 32.5±7.4 36.8±7.2 0.0014
HK 7.86±2.23 7.02±2.08 0.0325
对照组(n=150) APTT 34.8±7.3 37.8±7.6 0.0197
HK 7.85±2.12 7.01±2.02 0.0172
2.2 KNG1(-1742T>C，Ile581Thr)基因多态性在中国汉族人群中的分布特点 经Hardy-Weinberg遗传平衡检验样本群体代表性[6]。结果LEDVT组 字2=0.113，P=0.736；对照组 字2=0.114，P=0.735。符合Hardy-Weinberg遗传平衡定律，说明样本来自一个较大的、随机婚配平衡状态的有一定代表性的群体。
2.3 KNG1基因多态性检测结果分析 KNG1基因位于1742位点T→C的突变，T-455等位基因为野生基因，C-455等位基因为突变基因，三种基因型分别为：-1742TT型(野生型)、-1742TC型(杂合突变型)、-1742 CC(纯合突变型)。PCR产物的大小为324 bp，三种基因型被DraIII酶切后产生了3种不同的DNA片段。C-455等位基因含有1个DraIII酶切位点，而T-455等位基因缺乏DraIII酶切位点， -1742TT型基因无法被酶切仍为324bp的片段，-1742 CC型基因酶切后产成116 bp、208 bp两条片段，-1742TC型基因酶切后产生116 bp、208 bp、324 bp三条片段。
2.4 KNG基因频率分析 两组KNG1(-1742T>C，Ile581Thr)三种基因型频率分布不同，差异有统计学意义(u=3.702，P<0.0005)。见表3。
表3 两组KNG1(-1742T>C，Ile581Thr)基因型频率分布比较 例(%)
组别 TT型 TC型 CC型
病例组(n=143) 41(29) 73(51) 29(20)
对照组(n=150) 52(35) 74(49) 24(16)
3 讨论
HK肽链C末端附近含有组氨酸残基非常集中的肽段，并参与血液凝固反应，能加速激肽释放酶对凝血因子Ⅻ的激活。HK的作用则是作为XIIa和PK的辅因子，促进FXI和PK的激活，促进PK对FXII的激活，参与内源性凝血途径的接触活化。HK是激肽释放系统重要组成部分。
Merkulov等[7]研究发现，敲除KNG1基因的大鼠可延长部分凝血活酶时间，延缓动脉血栓的形成。Houlihan等[8]研究表明，在1477例老年人群中，KNG1基因与部分凝血活酶时间有显著的相关性。2011年，Morange等[9]在研究KNG1基因与静脉血栓关系中表明，Ile581Thr变种的KNG1是静脉血栓发生的一种新的危险因素。国内有关于KNG1基因与高血压关系的研究，在中国的汉族人群中，KNG1基因突变与原发性高血压有显著的相关性[10]。本实验研究发现，两组APTT、HK比较差异有统计学意义(P<0.05)，可认为LEDVT组的HK浓度高于对照组，APTT低于对照组。提示(1)血HK浓度升高可能是LEDVT的独立危险因素；(2)KNG1(-1742T>C，Ile581Thr)基因与APTT有关。按Hardy-Weinberg遗传平衡定律，公式计算结果：LEDVT组 字2=0.113，P=0.736；对照组 字2=0.114，P=0.735，说明样本来自一个较大的、随机婚配平衡状态的有一定代表性的群体。两组研究对象的三种基因型的对照结果显示：基因型频率构成比u=3.702，P<0.0005，同时研究发现，携带T-1742等位基因罹患下肢深静脉血栓的几率比携带C-1742等位基因的明显高。C-1742等位基因的结论与国外Houlihan和Morange的研究结果相近。提示KNG1-1742T>C基因多态性与下肢深静脉血栓形成相关，C-1742等位基因可能是下肢深静脉血栓形成的遗传危险因素。 根据本研究结果可以对下肢深静脉血栓形成的临床防治提出以下建议：(1)KNG1-1742T>C基因多态性的检测可能会成为下肢深静脉血栓形成的一级预防的有效手段。(2)携带C-1742等位基因，或携带-1742CC+TC基因型基因型者下肢深静脉血栓的易感性较高，应该加强针对携带此易感基因的人群的预防保健工作。(3)生化检查中HK高于正常的人群，APTT低于正常人群者应当使用药物或者非药物的手段使其达到正常人群的水平，从而达到预防和治疗下肢深静脉血栓的目的。
参考文献
[1] Colman R M， Schmaier A H.Contact system: a vascular biology modulator with anticoagulant， profibr inolytic， antiadhesive，and proinflammatory attributes[J].Blood，1997，7(90): 3819-3843.
[2] Ohkubo，Masayasu K， Toshinaga M.Effect of His-Gly-Lys motif derived from domain 5 of high molecular weight kininogen on suppression of cancer metastasis both in vitro and in vivo [J] . Biological Chemistry，2003，278(49):49301-49307.
[3] Asakursa S，Yang W，Sottile J，et al.Opposing effects of low and high molecular weight kininogens on cell adhesion[J]. Biochem，1998，124(3):473-484.
[4] Colman R W，Jameson B A， Lin Y， et al.Domain 5 of high molecular weight kininogen( kininostation) down regulates endothelial cell prolifer at ion and migration and inhibits angiogenesis[J].Blood，2000，95(2):543-550.
[5] 周圍血管疾病诊断及疗效标准.全国第四届中西医结合治疗周围血管疾病学会议论文选编[C].1995，10：154.
[6] 陈竺.医学遗传学[M].北京：人民卫生出版社，2002：101.
[7] Merkulov S， Zhang W M， Komar A A， et a1. Deletion of murine kininogen gene 1 (mKng1) causes loss of plasma kininogen and delays thrombosis[J]. Blood，2011，111(8): 1274-1281.
[8] Houlihan L M，Davies G，Tenesa A，et a1.Common variants of large effect in F12， KNG1， and HRG are associated with activated partial thromboplastin time[J].Am J Hum Genet，2010， 86(4):626-631.
[9] Morange PE， Oudot-Mellakh T， Cohen W， et a1. KNG1 Ile581Thr and susceptibility to venous thrombosis[J]. Blood，2011，117(13):3692-3694.
[10] Zhao W，Wang Y，Wang L， et al. Gender-specific association between the kininogen 1 gene variants and essential hypertension in Chinese Han population[J].J Hypertens，2009，27(7): 484-490.
(收稿日期：2012-03-19) (本文编辑：陈丹云)
【关键词】 下肢深静脉血栓形成； KNG1； 基因多态性
The Relationship between KNG1(-1742T>C，Ile581Thr)Polymorphisms and Plasma High Molecular Weight Kininogen，Lowerextremity Deep Venous Thrombosis/GAO Chao，CHEN Qun.//Medical Innovation of China，2012，9(17):001-003
【Abstract】 Objective：To investigate the relationship between KNG1(-1742T>C，Ile581Thr)polymorphisms and plasma high molecular weight kininogen，Lowerextremity Deep Venous Thrombosis. Methods：Polymerase chain reaction(PCR)and Restriction fragment length polymorphism (RFLP)were used to characterize KNG1(-1742T>C，Ile581Thr) genotypes.All of the genotypes were checked by DNA sequencing.SSPS 13.0 was used to analyze all the data.Results：(1)The levels of partial thromboplastin time(APTT)，Plasma high molecular weight kininogen (HK)had significant differences between two groups(P<0.05)，HK were higher in case group，APTT was lower in case group.(2)The distributions of KNG1(-1742T>C，Ile581Thr)genotypes between case group and control group were under the assumption of the Hardy-Weinberg equilibrium (P>0.05).(3)KNG1(1742T>C，Ile581Thr) genotypes and alleles had significant differences between two groups (P<0.05).Conclusion：(1)Increase of Fg and HK is an independent risk factor for LEDVT.(2)KNG1(-1742T>C，Ile581Thr)genotypes were associated with APTT.(3)KNG1(-1742T>C，Ile581Thr )genotypes were associated with the plasma high-molecular-weight kininogen.Subjects carrying -1742CC+TC genotypes tend to be more susceptible to higher HK concentration，and the T-1742 allele was associated with the plasma high molecular weight kininogen.(4)KNG1 (-1742T>C，Ile581Thr) genotypes were associated with LEDVT respectively.
【Key words】 Lowerextremity deep venous thrombosis； KNG1； Gene polyrnorphism
First-author’s address: Provincial Clinical Medical College of Fujian Medical University， Fuzhou 350001，China
doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2012.17.001
KNG1基因定位于第3号染色体包表达高分子量激肽原(HK)和低分子量激肽原(LK)。HK是120 kDa 的单链糖蛋白，主要作用是接触性激活[1]。HK 分为6 个结构域，6 区具有激肽释放酶原和凝血因子结合的位点，激肽释放酶使HK 在Lys362~Arg363 和Arg371~Ser372 之间裂解[2]，释放出缓激肽，同时产生两条链的活化型高分子激肽原( HKa)。 HKa 包含一个62 kDa的重链和一个56 kDa的轻链，并通过1 区Cys10和6 区Cys604之间形成的二硫键相连接[3]。 从HK 转变成HKa 的过程，伴随着显著的结构重排，HKa 以重新组成的结构域为特征，并且增加了第5 区的暴露面[4]，从而可以诱导增生的内皮细胞凋亡，抑制血管再生。高分子量激肽原第5结构域也可以阻碍黑素瘤细胞的新陈代谢，抑制血小板的粘附聚集，调节血小板与白细胞的相互作用。 1 资料与方法
1.1 一般资料 病例组(LEDVT组)：2011年1- 12月在福建省立医院住院的下肢深静脉血栓形成(LEDVT)患者共143例。纳入标准为：根据中国中西医结合学会周围血管疾病专业委员会制定的下肢深静脉血栓形成诊断标准进行诊断[5]，并全部经过下肢深静脉造影确诊。对照组：同期在福建省立医院门诊体检及住院的患者中无LEDVT病史者150例。两组研究对象均来自于福建本地的汉族人群，无血缘关系，非近期结婚。
1.2 所有研究对象排除标准如下：(1)手术、创伤史、严重感染；(2)急性心梗、急性心衰、急性脑血管意外者；(3)心脑血管其他部位血栓，既往血栓病史；(4)恶性肿瘤、严重肝肾疾病、尿毒症、糖尿病者；(5) DIC、近期内服用激素、免疫抑制剂、抗凝药、抗血小板药。
1.3 方法 (1)采血：所有研究对象均常规禁食8 h后，于次日清晨6点至8点抽取肘静脉血4 ml， 2 ml以乙二胺四乙酸(Ethylenediamine tetraacetic acid，EDTA)抗凝管收集，用于提取基因组DNA； 2 ml以枸橼酸钠抗凝管收集，用于测定血浆高分子量激肽原浓度。(2)血浆高分子量激肽原浓度测定：人的高分子量激肽原(HMWK)酶联免疫吸附测定试剂盒测定。(3)细胞基因组DNA提取试剂盒：购自北京天根生化科技有限公司。(4)PCR反应：2× MasterMix 12.5 μl、上游引物10uM 1 μl、下游引物10uM 1 μl、cDNA 2 μl 加DEPC水 8.5 μl组成25 μl体系。(5)引物：委托大连宝生物工程有限公司合成。(6)PCR产物酶切：PCR产物 10 μl、10×FastDigest buffer 2.0 μl、DraIII內切酶 1.0 μl加去离子水17 μl组成20 μl体系。
1.4 统计学处理 所有数据均用SPSS 13.0软件进行分析。计量资料以(x±s)表示，两组均数差异比较先行方差齐性检验(Levene Statistic)，方差齐采用t检验，方差不齐采用t’检验。研究对象与Hardy-Weinberg遗传平衡的符合程度采用四格表 字2检验。基因型频率构成比采用秩和检验。
2 结果
2.1 两组临床资料比较 两组活化部分凝血活酶时间(APTT)、高分子量激肽原(HK)比较差异均有统计学意义(P<0.05)，LEDVT组的HK浓度高于对照组，APTT低于对照组。见表1、表2。
表1 两组临床资料比较
组别 APTT HK
病例组(n=143) 33.5±7.5 7.86±2.31
对照组(n=150) 37.6±8.9 7.20±1.89
P值 0.036 0.003
表2 两组在 KNG1不同基因型间APTT、血浆HK的比较
组别 1742CC+TC型 1742TT型 P值
病例组(n=143) APTT 32.5±7.4 36.8±7.2 0.0014
HK 7.86±2.23 7.02±2.08 0.0325
对照组(n=150) APTT 34.8±7.3 37.8±7.6 0.0197
HK 7.85±2.12 7.01±2.02 0.0172
2.2 KNG1(-1742T>C，Ile581Thr)基因多态性在中国汉族人群中的分布特点 经Hardy-Weinberg遗传平衡检验样本群体代表性[6]。结果LEDVT组 字2=0.113，P=0.736；对照组 字2=0.114，P=0.735。符合Hardy-Weinberg遗传平衡定律，说明样本来自一个较大的、随机婚配平衡状态的有一定代表性的群体。
2.3 KNG1基因多态性检测结果分析 KNG1基因位于1742位点T→C的突变，T-455等位基因为野生基因，C-455等位基因为突变基因，三种基因型分别为：-1742TT型(野生型)、-1742TC型(杂合突变型)、-1742 CC(纯合突变型)。PCR产物的大小为324 bp，三种基因型被DraIII酶切后产生了3种不同的DNA片段。C-455等位基因含有1个DraIII酶切位点，而T-455等位基因缺乏DraIII酶切位点， -1742TT型基因无法被酶切仍为324bp的片段，-1742 CC型基因酶切后产成116 bp、208 bp两条片段，-1742TC型基因酶切后产生116 bp、208 bp、324 bp三条片段。
2.4 KNG基因频率分析 两组KNG1(-1742T>C，Ile581Thr)三种基因型频率分布不同，差异有统计学意义(u=3.702，P<0.0005)。见表3。
表3 两组KNG1(-1742T>C，Ile581Thr)基因型频率分布比较 例(%)
组别 TT型 TC型 CC型
病例组(n=143) 41(29) 73(51) 29(20)
对照组(n=150) 52(35) 74(49) 24(16)
3 讨论
HK肽链C末端附近含有组氨酸残基非常集中的肽段，并参与血液凝固反应，能加速激肽释放酶对凝血因子Ⅻ的激活。HK的作用则是作为XIIa和PK的辅因子，促进FXI和PK的激活，促进PK对FXII的激活，参与内源性凝血途径的接触活化。HK是激肽释放系统重要组成部分。
Merkulov等[7]研究发现，敲除KNG1基因的大鼠可延长部分凝血活酶时间，延缓动脉血栓的形成。Houlihan等[8]研究表明，在1477例老年人群中，KNG1基因与部分凝血活酶时间有显著的相关性。2011年，Morange等[9]在研究KNG1基因与静脉血栓关系中表明，Ile581Thr变种的KNG1是静脉血栓发生的一种新的危险因素。国内有关于KNG1基因与高血压关系的研究，在中国的汉族人群中，KNG1基因突变与原发性高血压有显著的相关性[10]。本实验研究发现，两组APTT、HK比较差异有统计学意义(P<0.05)，可认为LEDVT组的HK浓度高于对照组，APTT低于对照组。提示(1)血HK浓度升高可能是LEDVT的独立危险因素；(2)KNG1(-1742T>C，Ile581Thr)基因与APTT有关。按Hardy-Weinberg遗传平衡定律，公式计算结果：LEDVT组 字2=0.113，P=0.736；对照组 字2=0.114，P=0.735，说明样本来自一个较大的、随机婚配平衡状态的有一定代表性的群体。两组研究对象的三种基因型的对照结果显示：基因型频率构成比u=3.702，P<0.0005，同时研究发现，携带T-1742等位基因罹患下肢深静脉血栓的几率比携带C-1742等位基因的明显高。C-1742等位基因的结论与国外Houlihan和Morange的研究结果相近。提示KNG1-1742T>C基因多态性与下肢深静脉血栓形成相关，C-1742等位基因可能是下肢深静脉血栓形成的遗传危险因素。 根据本研究结果可以对下肢深静脉血栓形成的临床防治提出以下建议：(1)KNG1-1742T>C基因多态性的检测可能会成为下肢深静脉血栓形成的一级预防的有效手段。(2)携带C-1742等位基因，或携带-1742CC+TC基因型基因型者下肢深静脉血栓的易感性较高，应该加强针对携带此易感基因的人群的预防保健工作。(3)生化检查中HK高于正常的人群，APTT低于正常人群者应当使用药物或者非药物的手段使其达到正常人群的水平，从而达到预防和治疗下肢深静脉血栓的目的。
参考文献
[1] Colman R M， Schmaier A H.Contact system: a vascular biology modulator with anticoagulant， profibr inolytic， antiadhesive，and proinflammatory attributes[J].Blood，1997，7(90): 3819-3843.
[2] Ohkubo，Masayasu K， Toshinaga M.Effect of His-Gly-Lys motif derived from domain 5 of high molecular weight kininogen on suppression of cancer metastasis both in vitro and in vivo [J] . Biological Chemistry，2003，278(49):49301-49307.
[3] Asakursa S，Yang W，Sottile J，et al.Opposing effects of low and high molecular weight kininogens on cell adhesion[J]. Biochem，1998，124(3):473-484.
[4] Colman R W，Jameson B A， Lin Y， et al.Domain 5 of high molecular weight kininogen( kininostation) down regulates endothelial cell prolifer at ion and migration and inhibits angiogenesis[J].Blood，2000，95(2):543-550.
[5] 周圍血管疾病诊断及疗效标准.全国第四届中西医结合治疗周围血管疾病学会议论文选编[C].1995，10：154.
[6] 陈竺.医学遗传学[M].北京：人民卫生出版社，2002：101.
[7] Merkulov S， Zhang W M， Komar A A， et a1. Deletion of murine kininogen gene 1 (mKng1) causes loss of plasma kininogen and delays thrombosis[J]. Blood，2011，111(8): 1274-1281.
[8] Houlihan L M，Davies G，Tenesa A，et a1.Common variants of large effect in F12， KNG1， and HRG are associated with activated partial thromboplastin time[J].Am J Hum Genet，2010， 86(4):626-631.
[9] Morange PE， Oudot-Mellakh T， Cohen W， et a1. KNG1 Ile581Thr and susceptibility to venous thrombosis[J]. Blood，2011，117(13):3692-3694.
[10] Zhao W，Wang Y，Wang L， et al. Gender-specific association between the kininogen 1 gene variants and essential hypertension in Chinese Han population[J].J Hypertens，2009，27(7): 484-490.
(收稿日期：2012-03-19) (本文编辑：陈丹云)