为研究牛乳腺组织冷冻保存的可行性,将牛乳腺组织剪成直径小于0.5 mm的组织块,以含20%NBS和10%DM-SO的DMEM/F12作为冷冻保护液,按如下程序进行冷冻保存:4℃平衡1 h,-20℃平衡2 h,-40℃平衡2 h,-80℃保存。1周后,复苏牛乳腺组织,检测组织的存活率,分离培养乳腺细胞,检测细胞的存活率,观察细胞生长状态。结果显示,复苏后的牛乳腺组织可重新贴壁生长,贴壁存活率为62.5%,经消化离散,可分离培养出乳腺细胞,细胞存活率为58.5%,培养24 h后细胞存活率为46.3%。随着培养时间延长,细胞活力恢复,第1代细胞存活率为93.2%,生长状态良好。该乳腺组织的冷冻方法操作简单、方便、快捷,且很好地保持了乳腺细胞的活力,为稳定和增加乳腺细胞的来源提供了很好的途径,为进一步研究乳腺的结构和发育提供了素材。