肉鸡IFN-alpha基因的克隆、序列分析以及在大肠杆菌中的表达

来源 :农业生物技术学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:sanye8879c
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
干扰素(IFN)是一种具有广谱抗病毒、抗肿瘤以及免疫调节等活性的细胞因子。本研究通过PCR从AA肉鸡基因组DNA中克隆了IFN-a(ChIFN-a)基因,测序分析,并将该基因与表达载体pQE30相连,构建重组表达质粒pQE30/ChIFN-a,以IPTG诱导在M15中进行表达。测序结果表明ChIFN-a的开放阅读框(ORF)是由486个核苷酸编码的,成熟蛋白为162个氨基酸,有4个糖基化位点,推测分子量为19kD。与DDBJ/Genbank中鸡IFN-a基因序列一致。表达产物经SDS-PAGE分析、ID-MULTI分析及Westem Blot分析表明,表达出19kD左右的融合蛋白,表达的蛋白量占总菌体蛋白的6.5%,包涵体占沉淀蛋白的30%。本研究为重组干扰素用作新型广谱抗病毒生物制剂和免疫增强剂的开发奠定了基础。 Interferon (IFN) is a cytokine that has a broad spectrum of anti-viral, anti-tumor and immunomodulatory activities. In this study, IFN-a (ChIFN-a) gene was cloned from AA broiler genomic DNA by PCR and sequenced. The gene was linked to the expression vector pQE30 to construct the recombinant plasmid pQE30 / ChIFN-a, which was induced by IPTG on M15 In the expression. Sequencing results showed that the open reading frame (ORF) of ChIFN-a was encoded by 486 nucleotides. The mature protein was 162 amino acids with 4 glycosylation sites and the deduced molecular weight was 19 kD. Consistent with the chicken IFN-a gene sequence in DDBJ / Genbank. SDS-PAGE analysis, ID-MULTI analysis and Westem Blot analysis showed that about 19kD fusion protein was expressed, which accounted for 6.5% of the total bacterial proteins and inclusion bodies accounted for 30% of the precipitated protein. This study laid the foundation for the development of recombinant interferon for use as a novel broad-spectrum antiviral biologic and immunostimulant.
其他文献
资金不足,名气也不大,靠什么胜出? 一、定位避实就虚利用个性化服务提高顾客忠诚度大学毕业后,王小平凑了10多万元,在闹市区开了一家“靓影”化妆品店(地址:562400贵州省兴
用MOS(金属氧化物半导体)结构的C-V(电容-电压)特性来研究Si-SiO_2界面的质量,是一个已为大家熟知的方法。流行的作法是在氧化好的Si片上金属化铝制作MOS电容,然后测量此MOS
被称为国际植物园的宝地名山——大围山,界于东径103°33′—104°,北纬22°30′—23°之间。位于我省东南边境屏边、河口两县境內。大围山,系南岭山脉的支脉六绍山之余脉全
本文论述一种一束光反射式全息干涉方法。这种方法具有不需隔振,对激光器相干性要求不高,便于分析处理条纹数据和白光再现等优点,为在工矿现场和科学实验中推广应用全息干涉
引言采用氧化钡热阴极的高压真空管与没有这种阴极的高压真空管相比,耐压强度通常要差。这是由于钡和氧化钡(或者单纯的氧化钡)沉积在电极上,降低了金属表面的逸出功,从而使
目的:通过改善药品管理,改进现行医院药学服务模式。方法:就目前药品管理的缺陷,针对性地制定药品管理制度。同时根据现代药学服务和药品管理的规定,结合本院门诊药房的特殊
随着情报处理系统向高性能化发展,对双极的单块集成电路高速化的要求也越来越强了。以前,做为适应这种要求的方法,从电路设计、制造过程等方面采用了各种各样的方法,而从制
当今世界,随着计算机软硬件及家庭娱乐业的发展,CD类产品迅猛普及。中国从1995年开始引进CD-R光盘刻录机,尽管它只允许计算机用户在CD-R光盘上一次性写入数据,但它却具有划时代的意
指导学生选材,是小学作文教学中始终不能放松的重要工作.要做好这项工作,就要从三年级片断训练和写短文开始,认真培养学生的选材能力,为日后他们作文能力的提高打下基础.
八宝树(Duabanga grandiflora(Roxbet DC)walp.)分布干我国云南、广西南部及东南亚一些国家,是速生用材树种。16龄树高可达30米,胸径约50厘米。八宝树花期3—5月,果熟期5—7