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粒细胞—巨噬细胞集落刺激因子／白细胞介素—3融合蛋白的表达研究

来源 :生物工程学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：rrtaobao123

【摘 要】

：

利用ＰＣＲ扩增得到粒细胞－巨噬细胞集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）、白细胞介素－３（ＩＬ－３）完整基因片段，将其分别克隆ｐＧＥＭ－Ｔ构建成ＧＭ－ＣＳＦ／ＩＬ－３融合蛋白基因，ＤＮＡ序列与设计预期一致。将得到的融合蛋白基因克隆对７２ＲＮＡ聚合酶表达载体ｐＴ７ｚｚ，得到表达

【作 者】

：

张毅 屈贤铭 

【机 构】

：

中国科学院上海生命科学院生物工程研究中心

【出 处】

：

生物工程学报

【发表日期】

：

2000年3期

【关键词】

：

融合蛋白 基因表达 基因药物 GM-CSF IL-3 Fusion protein  gene expression  haemopoietic growth 

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利用ＰＣＲ扩增得到粒细胞－巨噬细胞集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）、白细胞介素－３（ＩＬ－３）完整基因片段，将其分别克隆ｐＧＥＭ－Ｔ构建成ＧＭ－ＣＳＦ／ＩＬ－３融合蛋白基因，ＤＮＡ序列与设计预期一致。将得到的融合蛋白基因克隆对７２ＲＮＡ聚合酶表达载体ｐＴ７ｚｚ，得到表达质粒ｐＦｕ，经转化至表达宿主Ｅ．ｃｏｌｉ ＢＬ２１（ＤＥ３），在ＩＰＴＧ诱导下获得融合蛋白目的产物的直接表达。经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳鉴

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