【摘 要】
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目的了解ClpE对肺炎球菌蛋白表达的影响。方法用长臂同源多聚酶链式反应(LFH-PCR)方法失活clpE基因,用PCR、测序鉴定缺陷菌株;通过固相pH梯度双向凝胶电泳(2D-PAGE)分别分离
【机 构】
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重庆医科大学医学检验教育部重点实验室
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目的了解ClpE对肺炎球菌蛋白表达的影响。方法用长臂同源多聚酶链式反应(LFH-PCR)方法失活clpE基因,用PCR、测序鉴定缺陷菌株;通过固相pH梯度双向凝胶电泳(2D-PAGE)分别分离野生菌和clpE缺陷菌的总蛋白质;经凝胶银染色、PDQuest2DE软件分析获得2个菌株的蛋白质表达谱;选取差异蛋白质点进行MEDLI-TOF质谱分析,查询数据库,获取有意义的蛋白点。结果以肺炎链球菌D39的图谱为参考,△clpE与其匹配率为61%。挑选17个有明显差异表达的蛋白点进行MALDI-TOF-MS分析,获
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